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拟枝孢镰刀菌PCR试剂盒

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  • ¥1990
  • XKbio
  • XK-P4576
  • 国产
  • 2025年08月25日
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      100

    • 英文名

      Fusarium sporotricoides

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      上海晅科生物科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      50次

    拟枝孢镰刀菌PCR试剂盒
    英文名称:Fusarium sporotricoides
    荧光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR,RTFQ PCR) 是1996 年由美国Applied Biosystems 公司推出的一种新定量试验技术,它是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。为此本公司开发了简单快捷的拟枝孢镰刀菌PCR试剂盒。

    产品细节图片1

    产品特点:

    1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。 
    2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增拟枝孢镰刀菌。 
    3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。 
    4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 
    5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

    拟枝孢镰刀菌PCR试剂盒包装规格及成分:

    编号

    成分

    规格

    试剂一

    PCR MagicMix 3.0 1 mL(红盖)

    试剂二

    超纯水 1 mL(亮黄色)

    试剂三

    拟枝孢镰刀菌 PCR 引物混合液 100 μL(白盖)

    试剂四

    拟枝孢镰刀菌 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL) 50 μL(黄盖)

    试剂五

    使用手册 1 份

    运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。

    自备试剂:DNA 模板

    产品细节图片2

     

    使用方法:

    一、样品 DNA 的制备
    1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
    2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求 的样品起始量)中加 10μL 拟枝孢镰刀菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液 而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰 上待用。
    二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
    3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

    成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照
    PCR Magic Mix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
    拟枝孢镰刀菌 PCR 引物 混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL
    N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL    
    PCR 阴性对照(水)   18 μL  
    PCR 阳性对照(拟枝孢镰刀菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液)     18 μL

    4. 按下表设置 PCR 反应:

    过程 温度 时间
    预变性 95℃ 5 min
    PCR 反应 (35 个循环) 95℃ 30 sec
    55℃ 30 sec
    72℃ 30 sec
    最后延伸 72℃ 7 min


    三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排 除 PCR 抑制剂的感染。
    产品细节图片3

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