概述 根据结核分枝杆菌类泛素蛋白酶体系统中底物Pup分子在体外能够招募PafA连接酶发挥邻近标记作用的实验原理,上海交大团队研发了一套基于底物的新型邻近标记技术,命名为 Specific Pupylation as IDEntity Reporter(SPIDER)。该技术可应用于蛋白-蛋白、蛋白-核酸、蛋白-小分子相互作用的筛选和发现。 相比其他生物分子-蛋白互作检测技术,该方法无需提前将标签和诱饵分子进行融合,摆脱对融合蛋白表达准确性的依赖,应用范围更广;此外,该技术可以用严苛的条件进行洗脱,降低非特异蛋白的干扰,富集能力强,结果准确性更高,同时兼具操作简单快捷的优点。