- ￥699 - 1999
- KA&M-BIO
- 上海
- MZ21094
- 2026年04月26日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20
- 英文名：
pYES2-NTC
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 规格：
管
pYES2-NTC可提供干粉质粒、菌液。使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
4、42℃热激90s，再冰浴2min；
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
pYES2-NTC圻明公司现货供应，可按客户需求单独构建载体，
一、载体构建：
(1)目的DNA片段和载体的制备；
(2)目的DNA片段和载体的连接；
(3)连接产物的转化；
(4)克隆筛选。
(5)测序验证及目标质粒交付
二、详细内容
1、以PCR扩增为基础的各类载体构建，如大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体；报告基因载体等；
2、基因定点突变，包括单点突变，多点突变，基因缺失等；
3、载体元件替换和改造；
4、siRNA载体和miRNA表达载体构建；
5、过表达载体构建。
详询客服。公司整合了国外数个基因库资源，具有以下优势：
种属齐全：人、小鼠、大鼠、其它种属；
数量众多：多达几万数量cDNA克隆（cDNA模板质粒）和ORF克隆（ORF表达质粒）；
质量优异：保证目的基因序列正确，无氨基酸突变，每个克隆质粒均可提供相应的测序报告；
价格实惠：与您亲自调取基因相比，我们的服务让您更加省时、省力、省心；
pcDNA3.1/pre-miR-204 pre-miR-204
pcDNA3.1/pre-miR-143 pre-miR-143
pcDNA3.1-LNC-REG3G-3 LNC-REG3G
pcDNA3.1-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1
pcDNA3.1-FGD5-AS1 FGD5-AS1
pcDNA3.1-KCNQ101T1 KCNQ101T1
pcDNA3.1-h-RSF1 h-RSF1
pcDNA3.1-h-LOXL2 h-LOXL2
pcDNA3.1-h-SOX21-AS1 h-SOX21-AS1
pcDNA3.1-h-SOX21 h-SOX21
pcDNA3.1-h-LINC00958 h-LINC00958
pcDNA3.1-LINC01811 LINC01811
pcDNA3.1-LOC101928219 LOC10928219
pcDNA3.1-Lnc-BCYRN1 Inc-BCYRN1
pcDNA3.1-lncRNA-ISR22 lncRNA-ISR22
pcDNA3.1-circ-001862 circ-001862
pcDNA3.1-circ0058514 circ0058514
pcDNA3.1-circ-sirt1 circ-sirt1
pSilencer-siSTX18-AS1 STX18-AS1 shRNA
pSilencer-shR-AFAP1-AS1 AFAP1-AS1 shRNA
pSilencer-shR-LNC-REG3G LNC-REG3G shRNA
pSilencer-shR-LNC00507 LNC00507 shRNA
pSilencer-shR-RNASEH1-AS1 RNASEH1-AS1 shRNA
pSilencer-shR-SPACA6P-AS SPACA6P-AS shRNA
pSilencer-shR-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 shRNA
pSilencer-shR-LINC00115 LINC00115 shRNA
pSilencer-shR-INCRNAISR22 INCRNAISR22 shRNA
pSilencer-shR-Lnc-DLK1 Lnc-DLK1 shRNA
pSilencer-shR-LINC01811 LINC01811 shRNA
pSilencer-shR-LOC10928219 LOC10928219 shRNA
pSilencer-shR-ADAMTS9-AS1 ADAMTS9-AS1 shRNA
pSilencer-shR-circ0001862 circ0001862 shRNA
pSilencer-shR-circ0058514 circ0058514 shRNA
pSilencer-shR-miR-5193 miR-5193 shRNA
pSilencer-shR-miR-4635 miR-4635 shRNA
pcDNA3.1-ADAMDEC1 ADAMDEC1
pcDNA3.1-ASIC2 ASIC2
pcDNA3.1-Myc-B27(C-tag) B27
pcDNA3.1-BLK BLK
pcDNA3.1-Braf Braf
pcDNA3.1-HA-CD58 CD58
pcDNA3.1-CLIC4 CLIC4
pcDNA3.1-3×Flag-CD134 CD134
pcDNA3.1-3×Flag-CD274 CD274
pcDNA3.1-3×Flag-C7(N-tag) C7
pcDNA3.1-DUSP6 DUSP6
pcDNA3.1-3×Flag-DFF-b(N-tag) DFF-b
pcDNA3.1-E2F1 E2F1
pcDNA3.1-ESR2 ESR2
pcDNA3.1-EYA2 EYA2
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pcDNA3.1-3×Flag-GREM1 GREM1
pcDNA3.1-GSK3B GSK3B
pcDNA3.1-3×Flag-Gli1 Gli1
pcDNA3.1-3×Flag-HOXA9 HOXA9
pcDNA3.1-H2A-XY39E H2A-XY39E
pcDNA3.1-3×Flag-HIF1a HIF1a
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pcDNA3.1-3×Flag-IGFBP3 IGFBP3
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文献和实验。 2. NTC（无模板阴性对照）出现 CT 值，目的基因的 CT 值还能使用吗？ NTC（无模板阴性对照）出现扩增一般会有两种情况： （1）通过观察融解曲线，NTC 与目的基因融解曲线峰形不重叠。一般 NTC 的 Tm 值较目的基因 Tm 值小。 这种情况下，NTC 的 CT 值是由引物二聚体造成的，并不影响目的基因 CT 值的采集。 （2）NTC 与目的基因融解曲线峰形重叠。NTC 的 Tm 值等于目的基因的 Tm 值。 这种情况下，说明体系已被气溶胶污染了。那么，体系被污染，目的
度的检测手段对实验过程中的污染也非常敏感，我们也无法从单一孔中的扩增曲线来判断是否来源于污染还是来源于真实样本的扩增。这时，就需要阴性对照来监控和发现污染的发生。常用的阴性对照包括以下几种： 无模板对照 No Template Control, NTC 使用水代替定量 PCR 反应中的核酸，其它试剂照常加入，用于监控扩增反应体系中的污染。正常情况下，NTC 孔不会有扩增；当 NTC 出现扩增，则预示体系中有污染。在 SYBR Green 实验中，NTC 出现扩增也可能是来源于引物二聚体的形成
实验步骤 1. 酵母表达载体的构建 1) 用引物扩增目的基因全长片段，将它克隆到pGEM-T Easy载体上，转化大肠杆菌DH5α，分别获得阳性克隆； 2) 提取酵母表达载体pYES2和目的片段的质粒； 3) 用EcoR I和Not I双酶切pYES2载体和连有各目的片段的pGEM-T Easy载体； 4) 琼脂糖凝胶电泳分离酶切片段； 5) 回收目的
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