- ￥8500 - 38600
- LMB™
- 中国
- LMB-AOC -100-KIT/LMB-AOC -500-KIT
- 2026年03月22日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
见产品说明
- 保质期：
见产品说明
- 英文名：
Ovarian Cancer Organoid Culture Medium Kit
- 库存：
10
- 供应商：
朗智生物
- CAS号：
-
- 规格：
100ml/kit/500ml/kit
| 规格： | 100ml/kit | 产品价格： | ￥8500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ml/kit | 产品价格： | ￥38600.0 |
试剂盒产品信息
| 产品组成 | 规 格 | 储存条件及周期 | ||
| 100Kit | 500kit | |||
| 1 | 类器官培养基 A | 100ml | 500ml | 在-20℃可保存12个月，使用时在4℃冰箱缓慢融化；储存于 2-8℃，有效期3个月 |
| 2 | 原代培养缓冲液 B | 250ml | 500ml*2 | 4-20℃ ，2 year |
| 3 | 原代组织消化液 C | 30ml | 150ml | 4-20℃ ，1 year |
| 4 | 类器官传代消化液 D | 30ml | 150ml | 4-20℃ ，1 year |
| 5 | 组织保存液 E | 100ml | 500ml | 4-20℃ ，1 year |
| 6 | 类器官冻存液 F | 20ml | 100ml | 4-20℃ ，2 year |
| 7 | 类器官传代培养缓冲液 G | 250ml | 500ml*2 | 4-20℃ ，2 year |
操作步骤：
1、 原代
(1) 取材后的组织须放在预冷的(2 - 8℃) 含有组织保存液 E 的取样瓶中，快速转运 至洁净实验室进行组织处理和细胞分离，拍照并登记信息。
(2) 准备若干培养皿，加入 4℃预冷的原代培养缓冲液 B 备用
(3) 取样瓶消毒，将组织放入培养皿中，利用原代培养缓冲液 B 清洗三次后，利用眼科剪 或手术刀将肿瘤组织剪切成体积约为 1~3 mm3 的组织块。
(4) 组织用原代组织消化液 C 消化， 37℃震荡消化 10-20 min，(消化过程中随时观察 消化情况) 。
(5) 取少量液体在显微镜下观察，镜下观察到较多的单个细胞或 70μ m 以下的细胞簇后， 加入三倍体积原代培养缓冲液 B 终止消化。
(6) 使用 100μm 孔径的筛网进行过滤，将滤液收集后，于 300g 富集离心 5min 后移去上清， 添加原代培养缓冲液 B 重新重悬离心。
(7) 基质胶计算：第 6 步后观察收集到的组织体积， 添加 25-30 倍组织体积的基质胶重悬铺 板。
(8) 24 孔细胞培养板为例， 每孔点胶 25ul 组织基质胶混合物进行铺板(4℃下操作)。
(9) 将铺好的培养板放入 37℃培养箱中 10- 15min 成胶， 添加类器官培养基 A (恢复室 温)进行培养。
2、 类器官传代培养
(1) 移液器吸去培养基， 每孔添加 1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液 G 放置 2min。
(2) 移液抢轻柔吹打基质胶，收集在 15ml 离心管中， 4℃静置 10min 。 (每 6-8 孔为一组)
(3) :3.1 类器官数量不足或体积较小时： 离心 5min 弃去上清，添加适量类器官传代培养缓 冲液 G 重悬移入 1.5ml 离心管， 300g 离心 5min 弃去液体进行第 4 步。
3.2 类器官数量较多或体积较大时： 离心 5min 弃去上清， 添加适量类器官传代消化液 D消化 2-3min，添加类器官传代培养缓冲液 G 终止消化，离心 5min 弃去混合液，添加适量类 器官传代培养缓冲液 G 重悬移入 1.5ml 离心管， 300g 离心 5min 弃去液体进行第 4 步。
(4) 类器官收集后， 添加基质胶重悬， 每孔 25μl 基质胶铺在 24 孔细胞培养板中， 放置培养 箱中 10- 15min 添加 500μl 类器官培养基 A。
3、 类器官冻存
(1) 移液器吸去培养基， 每孔添加 1-2ml 4℃类器官传代培养缓冲液 G 放置 2min。
(2) 移液抢轻柔吹打基质胶，收集在 15ml 离心管中， 4℃静置 10min 。 (每 6-8 孔为一组)
(3) 离心 5min 弃去上清，添加适量类器官传代培养缓冲液 G 再次重悬， 300g 离心 5min 弃 去液体。
(4) 添加适量类器官冻存液 F，轻柔吹打重悬，以 24 孔细胞培养板为例： 密度为 2 个孔冻 存 1 管，每管体积 1.4ml。
(5) 做好标记信息，进行程序降温后，移入液氮长期保存，
4、 类器官复苏
(1) 取 10ml 类器官传代培养缓冲液 G 于 15ml 离心管中
(2) 从液氮罐中取出冻存的类器官细胞，快速置于 37℃水浴锅中融解。
(3) 水浴融解过程中，需轻轻摇动冷冻管， 以确保冻存液在 1-2 分钟内完全融解。
(4) 将溶解后的类器官细胞快速转移至 15ml 离心管， 使用移液管轻轻吹打 6-8 次，300g 离心 5 分钟，然后除去上清液并收集类器官细胞沉淀。添加适量类器官传代培养缓冲液 G 重悬移入 1.5ml 离心管 300g 离心 5min。
(5) 基质胶重悬，每孔 25μl 基质胶铺在 24 孔细胞培养板中，放置培养箱中 10- 15min 成胶， 添加 500μl 类器官培养基 A。
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文献和实验【2,3】；此外，初始化疗后通常会由于铂类耐药而复发，因此建立更精准的卵巢癌模型对于深入理解疾病机理和个性化治疗是必不可少的。基于类器官技术的 OC 类器官就是可以模拟来源组织关键特征的体外模型，不仅能够再现患者体内肿瘤的特异性（包括表型特性和基因突变），并能够检测患者对药物的敏感性。 本篇文章基于STAR protocol【4】发表的文章，整理了病人组织来源的卵巢癌类器官的培养方案。 图 1. 病人组织来源的卵巢癌类器官培养方案【5】 细胞来源 活检样本或手术样本 培养基配方 取样培养基
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。 由于人脑类器官的结构复杂，本文基于 Nature protocols 的方案，以背侧(hCS)前脑球体为例，简要介绍来源于 PSCs 的脑类器官培养流程【1】。 人脑类器官的培养 材料 细胞：hPSCs 或 iPSCs 细胞 主要培养基 基础培养基（主要成分：20% KSR，1% NEAA，0.5% GlutaMAX，0.1mM 2-Mercaptoethanol，10 ng/ml FGF2）； 神经诱导培养基（主要成分：20% KSR，1% NEAA，0.5% GlutaMAX，0.1mM
