15mL离心管冻存盒，可放置25个15mL试管，耐低温-86

Omega质粒DNA中量提取流程

加入1/10体积的ETR，颠倒7-10次后溶液变得浑浊，冰浴10-20min。 10. 42°C水浴5min后，25°C，3，000-5，000xg离心5min，ETR溶液将在管底形成蓝色分层。离心后，如果溶液中有大量的液滴悬浮，静置10分钟让液滴自然沉降。 11. 转移上清液移至离心管中，加入0.5倍体积无水乙醇(室温)，混匀后室温静置1-2min。 12. 将HiBind® 中量柱装在15ml收集管中。转移20ml混合液至柱子內，室温下3，000-5，000xg离心

用 CD3/CD28 做好 T 细胞激活与扩增

细胞筛网置于培养皿中，取小鼠脾脏放置于筛网中，加入 5ml 达优小鼠淋巴细胞分离液，对脾脏轻轻进行研磨（注：此步操作要快，避免分离液蒸发）； 2. 把悬有脾脏细胞的的分离液立即转移至 15ml 离心管中，随后在分离液上层轻轻覆盖 500-1000μl 的 RPMI1640 培养基（保持分离液与培养基分界明显）； 3. 室温，水平转子 800g 离心 30 分钟，设置离心机为缓升缓降； 4. 离心结束后吸出淋巴细胞层（白膜层），加入 10ml RPMI1640 洗涤一遍细胞，250g 离心 10

类器官培养与应用——卵巢癌类器官

Y27632 - - 10μM -   DMSO - - - 10%     组织处理 1、将取样培养基中的组织转移到培养皿中，用 PBS 多次冲洗至液体变澄清。然后用无菌手术刀剔除脂肪及坏死组织。 2、将组织切割为 1–2 mm3 的小块，此步骤可以留存适量组织用于测序、免疫组化分析等。 3、将所有剩余的组织碎片收集到 30 ml 锥形管中，加入 8 ml 解离培养基，并在 37°C条件下解离 1-2h。每隔 20min，利用移液器机械吹打