7-AAD；7240-37-1

7-AAD 是一种荧光 DNA 染料，是一种有效的 RNA 聚合酶 (RNA polymerase) 抑制剂。7-AAD 选择性结合到 DNA 的 GC 区域，还具有抗菌作用。

该操作说明适用于大多数细胞，但不同的细胞类型、细胞密度、使用的培养基以及其他一些因素都有可能影响染色效果，本说明仅供参考。
（1）储存液的制备：取适量DMSO加入到7-AAD配制成1-10 mM，该储存液可分装于-20℃稳定保存6个月。（2）根据自身样本选择合适的步骤固定细胞。7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行，且仅仅染色死细胞。
（3）离心收集细胞，并用合适的的缓冲盐溶液或者培养基(pH=7.4)重悬细胞。
注：贴壁细胞可在盖玻片或者培养板上进行原位染色。
（4）加入适量7-AAD染色液，推荐该染料的工作浓度为0.5-5 µM，孵育15-60 min。
注：首次实验建议在推荐的工作浓度范围内设置浓度梯度检测，从而摸索最佳的染色浓度。
（5）根据其激发发射波长（Ex/Em=545 nm/650 nm）在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。