白色念珠菌PCR试剂盒

白色念珠菌PCR试剂盒

英文名称：Candida albicans PCR Kit 
白色念珠菌（Canidia albicans）又叫白假丝酵母菌是一种真菌，通常存 在于正常人口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机体中数量少，不引起 疾病，当机体免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制约作用失调，则本 菌大量繁殖并改变生长形式（芽生菌丝相）侵入细胞引起疾病。其中包括皮肤 念珠菌病（好发于皮肤皱褶处，皮肤潮红、潮湿、发亮，有时盖上一层白色或 呈破裂状物，病变周围有小水泡）、粘膜念珠菌病（以鹅口疮、口角炎、阴道炎 最多见）、内脏及中枢神经念珠菌病（可由粘膜皮肤等处病菌播散引起，有肺炎、 肠胃炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等，偶尔也可发生败血症）。因此快速灵敏检 测梭状芽孢杆菌具有重要的意义，本试剂盒就是为此目的根据 PCR 原理开发。

产品特点：
1. 即开即用，用户只需要提供细菌 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增白色念珠菌 DNA。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次。
6. 本产品只能用于科研。

白色念珠菌PCR试剂盒包装规格及成分：

编号	成分	规格
试剂一	PCR MagicMix 3.0	1 mL（红盖）
试剂二	超纯水	1 mL（亮黄盖）
试剂三	白色念珠菌 PCR 引物混合液	100 μL（白盖）
试剂四	白色念珠菌 PCR 阳性对照 （1×10E8 拷贝/μL）	50 μL（黄盖）
试剂五	沙核酸释放剂试用装	20 次（1mL、绿盖）
试剂六	使用手册	1 份

运输及保存：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其 他试剂。

自备试剂：DNA 模板


 

使用方法：

一、样品 DNA 的制备 1. 如果有 N 个样品，必须设置 N+2 个提取，多出的一个是 PC（样品制备阳 性对照），一个是 NC（样品制备阴性对照）。可以用 10μL 阳性对照的 100 倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作 为 PC。另外用水作为 NC。2. 用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌 DNA 提取试 剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌 DNAout 或柱式细菌 DNAout。本试 剂盒免费赠送 20 次免 DNA 提取的核酸释放剂，本产品的裂解液可以直接作为 PCR 模板，省略了 DNA 提取步骤。
二、设置 PCR 反应（40 μL 体系） 3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分： 成分 N+2 个 样品管 PCR 阴性 对照 PCR 阳性 对照 PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL 白色念珠菌 PCR 引物混合液 各 2 μL 2 μL 2 μL N+2 个样品 DNA 模板 各 18 μL - - 样品制备阴性对照（超纯水） - 18 μL - 样品制备阳性对照（白色念珠菌 阳性对照的 10000 倍稀释液） - - 18 μL 4. 按下表设置 PCR 反应： 过程 温度 时间 预变性 95℃ 5 min PCR 反应 （35 个循环） 95℃ 15 sec 58℃ 15 sec 72℃ 60 sec 最后延伸 72℃ 10 min 三、电泳检测 5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。预期的 PCR 产物长度为 263bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩 增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

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