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人恶性非霍奇金淋巴瘤患者的自然杀伤细胞NK-92 (STR鉴

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  • 赛泓瑞生物
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  • SHC1137H
  • 2025年07月11日
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    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    种属

    别称

    NK92; Natural Killer-92; NK-92.05; Neukoplast; aNK

    组织来源

    外周血

    疾病

    恶性非霍奇金淋巴瘤,自然杀伤细胞;nk细胞

    传代比例/细胞消化

    1:2传代

    完全培养基配置

    75%MEMα(成分:含2mML谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,不含核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸),+12.5%热灭活马血清+12.5%进口胎牛+1%双抗+0.2mM肌醇+0.02mM叶酸+0.1mM β-Mer+200U/ml IL-2

    简介

    NK-92是从一位患有急进性非霍奇金淋巴瘤的50岁白人男性外周血单核细胞衍生来的一株白细胞介素-2依赖型NK细胞株。这株细胞对很多恶性细胞有细胞毒性;铬释放试验显示它能杀死K562和Daudi细胞。NK-92细胞(经过照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的体外免疫清扫而不危及血细胞的功能。NK-92细胞有以下特征: CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面标记阳性,CD56亮;CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, CD19, CD20, CD23, CD34和HLA-DR表面标记阴性。

    形态

    淋巴母细胞样

    生长特征

    悬浮生长

    倍增时间

    ~40-50h

    STR

    Amelogenin: X,Y CSF1PO: 11,12 D13S317: 9,12 D16S539: 11,12 D5S818: 12,13 D7S820: 10,11

    THO1: 6,9.3 TPOX: 8 vWA: 18

    培养条件

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    冻存条件

    冻存液:90%FBS,DMSO 10%,

    或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040

    保藏机构

    ATCC; CRL-2407

    该细胞为悬浮细胞,请注意离心收集细胞悬液,请勿直接倒掉细胞培养液。

    产品使用

    仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。


    细胞培养操作
    1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
    3. 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
    a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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