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- 赛泓瑞生物
- 进口
- SHC1105H
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
SHCC
- 运输方式：
干冰/常温
- 年限：
10年
- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 规格：
1*10^6cell/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
HCMEC/D3; CMEC/D3; human Cortical Microvessels Endothelial Cells/D3 |
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组织来源 |
人脑微血管 |
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疾病 |
转化细胞系 |
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传代比例/细胞消化 |
1：2-1:3传代，消化1-2分钟 |
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完全培养基配置 |
ECM培养基 |
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简介 |
hCMEC/D3 细胞系来源于人颞叶微血管，该微血管从手术期间切除的组织中分离出来，用于控制癫痫。初级分离物富含脑内皮细胞（CEC）。在第一个通道中，细胞通过慢病毒载体转导与人端粒酶催化亚基 (hTERT) 和 SV40 大 T 抗原依次永生化，然后通过有限稀释克隆选择性分离 CEC，并对克隆进行广泛的脑内皮表型表征。这种脑微血管内皮细胞系代表了一种这样的人类 BBB 模型，它可以很容易地生长，并且可以对与中枢神经系统 (CNS) 相关的病理和药物转运机制进行细胞和分子研究。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
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STR |
Amelogenin X CSF1PO 10,12 D1S1656 15.3,17.3 D2S441 13 D2S1338 16,20 D3S1358 16,17 D5S818 11 D7S820 10,12 D8S1179 15,16 D10S1248 14,15 D12S391 19.3,22 D13S317 11,14 D16S539 9,12 D18S51 12,19 D21S11 30,32.2 D22S1045 11,15 FGA 22,26 Penta D 10,12 Penta E 5,10 TH01 7,9 TPOX 10,11 vWA 14,17 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液：90%FBS，DMSO 10%, 或使用非程序冻存液：官网货号SH-H040 |
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保藏机构 |
BCRJ 0401 |
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产品使用 |
仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1）复苏细胞：将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
a、收集细胞，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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