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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
SHCC
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
1*10^6cell/T25
| 种属 | 人 |
| 别称 | HUH-28; HuH28; HUH28 |
| 组织来源 | 肝脏组织 |
| 疾病 | 胆管癌 |
| 传代比例/细胞消化 | 1:2传代,消化2-3分钟 |
| 完全培养基配置 | RPMI1640培养基;10%胎牛血清;1%双抗 |
| 形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特征 | 贴壁生长 |
| 倍增时间 | 每周 2 至 3 次 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
| 冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040 |
| 保藏机构 | JCRB; JCRB0426 |
| 产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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文献和实验分型已被 ICLAC、ATCC 等权威机构作为金标准应用于细胞鉴定,目前越来越多的杂志要求在投稿时提供细胞 STR 分型数据。最佳鉴定时间1、发表文章或申请课题经费前;2、使用细胞进行临床治疗(试验)前;3、准备冻存保种或已冻存多年的细胞;4、一个涉及到细胞试验项目开始 / 结束时;5、新得到的细胞或实验室培养 5 代以上的细胞;6、细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大;7、异体细胞移植后嵌合情况检查。科佰优势STR 鉴定的实验方法已经很成熟了,常规都是在 ABI 3730xl 上完成检测,由机器读取峰图,导出
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、技术意义: • 文章以Huh7人肝癌细胞代表转化细胞,以人胎肝原代培养细胞(HFH)和HH4人肝细胞系(来自永生化的胎肝细胞系)代表非转化细胞,抽提这些细胞并进行了蛋白质组学分析。这些细胞受激后的和非受激对照细胞的蛋白提取物都进行了ICAT标记,然后进行胰酶酶解、过阳离子交换柱以及亲合素亲合色谱柱。最后含有半胱氨酸的肽段通过毛细管液相色谱—串联质谱(MS/MS)进行分析。 • 质谱数据通过SEQUEST软件搜索IPI (v2.28)数据库,接下来采用新的统计学算法对每个实验的SEQUEST搜索
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