人结肠癌细胞HCT-15(STR鉴定正确)
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人结肠癌细胞HCT-15(STR鉴定正确)

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  • SHC871H
  • 2025年07月11日
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    • 供应商

      SHCC

    • 运输方式

      干冰/常温

    • 年限

      10年

    • 生长状态

      贴壁/悬浮

    • 规格

      1*10^6cell/T25

    种属

    别称

    HCT-15; HCT.15; HCT15

    组织来源

    结肠

    疾病

    结肠腺癌

    传代比例/细胞消化

    1:2传代,消化2-3分钟

    完全培养基配置

    RPMI1640培养基;10%胎牛血清;1%双抗

    简介

    DNA fingerprinting证据表明,这株细胞和DLD-1(ATCC CCL-221,人结直肠腺癌)来源于同一个人;但同工酶及细胞染色体组型分析仍存疑问;细胞呈CSAp阴性(CSAp-);角蛋白阳性

    形态

    上皮细胞样

    生长特征

    贴壁生长

    倍增时间

    ~24h

    基因表达

    carcinoembryonic antigen (CEA) 5.4 ng/10^6 cells/10 days. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining.

    致瘤性

    Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

    STR

    Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12;D13S317:8,11;D16S539:12,13;D18S51:11,17;D19S433:14,16;D21S11:29,32.2;D2S1338:17,25;D3S1358:17;D5S818:13;D7S820:10,12;D8S1179:15;FGA:22;TH01:7,9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19;

    培养条件

    气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    冻存条件

    冻存液:90%FBS,DMSO 10%,

    或使用非程序冻存液:官网货号SH-H040

    保藏机构

    ATCC; CCL-225

    产品使用

    仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。


    细胞培养操作
    1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
    2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
    3. 将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
    3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
    a、收集细胞,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
    b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
    c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

           南京赛泓瑞生物科技有限公司专注于是一家专注于研发和生产原代细胞、肿瘤细胞及细胞培养相关试剂产品的生物高科技企业,可以为各类研究机构提供符合标准规范的原代细胞、肿瘤细胞及相关实验技术服务;
           南京赛泓瑞生物科技有限公司有一支由南京大学和南京医科大学多名博士组成的研发团队,致力于为您的细胞研究及细胞培养实验提供高品质、稳定性良好的产品,做“您身边的细胞培养专家”。细胞培养提供全程服务,产品涵盖原代细胞、细胞系、免疫细胞及干细胞、胎牛血清、无血清非程序冻存液、完全培养基、基础培养基、“支原体”/“黑胶虫”清除试剂、细胞因子、胰酶、双抗等细胞培养及实验相关产品。


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