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- 英文名:
Bone Morphogenetic Protein 7(BMP-7 / OP-1), Human, recombinant (expressed in CHO Cells)
- 供应商:
上海壹科繁生物科技有限公司
- 规格:
10ug
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文献和实验1 和 xho1 进行双酶切,回收后产物与载体酶切回收产物连接即可。 重组法对于重组法,首先设计引物将目的基因 PCR 出来,即同源臂加基因引物,此时应注意,同源臂应包含酶切位点,同样以 PKM2 基因为例。其上下游引物分别为:设计好引物后,通过 PCR 方法扩增目的基因,胶回收后的产物与载体酶切回收产物重组即可。3. 转化,涂板,挑单克隆,测序。4. 质粒构建成功后即可转染观察是否能在细胞中表达。以上就是通过慢病毒包装体系在细胞中过表达基因的方法,此外还应注意几点:1. 在构建质粒时,最好可以加入 GFP
发展,目前已有多种表达系统可用于生产具有医疗价值的人或动物来源的蛋白质(表1)。大肠杆菌(E.coli)是使用最早的表达系统,其显著优点是易于操作,产量高,成本低,但由于用E.coli生产的蛋白质药物因缺乏糖基化而在人体内易被降解,因此它的药放大大降低。此外,它还存在易产生内毒素和包涵体的问题。真核细胞中CHO细胞是目前重组糖基蛋白生产的首选体系;因为与其他表达系统相比,它具有许多优点:①具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药物蛋白在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然蛋白分子;②具有
The OP9-DL1 System: Generation of T-Lymphocytes from Embryonic or Hematopoietic Stem Cells In Vitro
, except resuspend the cells (~8-10 x 105 cells), in 2 mL of freezing medium for OP9 cells per 10-cm dish. Preferably, freeze cells within the first two to three passages. 14. Aliquot 1 mL of cell suspension per cryovial. 15
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