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文献和实验小板的聚集,从而阻止血液凝固。 2 两种抗凝剂的特点 EDTA 钾盐在血液中的溶解性更好,因而使用较多,尤其是二钾盐——EDTA-K2 可以通过喷雾干燥法附着在采血管的内表面,不会对采集的血液样品产生稀释。 EDTA 对血细胞形态的影响比较小,有较好的稳定性,但 EDTA 会抑制或干扰纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合,不适于血凝和血小板功能的检测,也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。 肝素 肝素螯合力低,对水分子运动的影响小,对血液成分的干扰少,不影响红细胞体积,不引起溶血,可谓优点
细胞分离液 Ficoll (2)取抗凝外周血(全血)与无菌 PBS 按照 1:1 充分混匀,用移液管沿管壁缓慢叠加于分层液面上,动作一定要轻,注意保持清楚的界面。外周血,PBS,淋巴细胞分离液最终体积比为 1:1:1。 (3)水平离心 400 g 成×30 分钟(可根据淋巴细胞分离液 Ficoll 或离心机转子要求调整) (4)离心后可看见管内分为三层,上层为血浆和 PBS,下层主要为红细胞和粒细胞,中层为淋巴细胞分离液。在上、中层界面处有一以单个核细胞为主的白色云雾层狭窄带,主要就是单个核细胞,包括淋巴细胞与单核
方法 (1)多杀性巴氏杆菌荚膜抗原的制备 在血清裂解血琼脂平板上筛选待测的多杀性巴氏杆菌荧光性典型的菌落(荧光性弱的可通过小白鼠或本动物复壮),接种于血清裂解血琼脂斜面或改良马丁汤琼脂斜面,每株接两管,于37℃培养16h左右,达融合生长后,用2ml生理盐水(每管1ml)洗下,收集于小试管中,于56℃水浴30min,然后以8 000r/min离心30min,取上清液即可。 (2)红血球的醛化 无菌采取绵羊血,以阿氏液保存或以玻璃珠脱纤,用生理盐水将红血球洗涤3次,以pH 7.2 PBS配制成5%
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