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科邦兴业(北京)科技有限公司
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现货
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箱
SPL-911605Insert共培养皿-60mm 5小室 尼龙膜 灭菌 9个/包,2包/箱
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文献和实验瘤上清(ATCC号TIB120)、B7-2/CD86的杂交瘤上清(Pharmingen)、DEC-205的抗体(ATCC号HB290) 10. 解剖用品 11. 无菌纱布垫 12. 100mm培养皿(如Falcon) 13. 3ml注射器25G,5/8in(1.58cm)针头 14. 9in(23cm)巴氏吸管(填充棉花并高压灭菌) 15. Nytex滤器(3-40/26;Tetko)
20分钟,室温保存。 2.原代血管内皮细胞的获取与培养 按Jaffe等人〔1〕的方法加以改进。在无菌条件下取新生儿脐带,剪去钳痕和凝血块阻塞部分,找到脐静脉。一端插上带有胶管的玻璃管结扎固定,经胶管接注射器,用生理盐水灌洗。待脐静脉内的残血除净后,用37℃ PBS,冲洗两次,将另一端用铁夹夹闭,向脐静脉内灌注0.25%胰蛋白酶8~10ml,夹闭胶管放入已灭菌的大平皿中。37℃孵育12min,在此期间经常翻动脐带使酶溶液在血管内流动以促使内皮细胞均匀与酶接触。取出脐带后轻轻挤压管壁,将含有内皮
,确定出转染时间(2~24小时)。因LR对细胞有一定的毒性,转染时间以不超过24小时为宜。 细胞种类:COS-7、BHK、NIH3T3、Hela和Jurkat等任何一种细胞均可作为受体细胞。 1、操作步骤[方法一]: (1)细胞培养:取6孔培养板(或用35mm培养皿),向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液,37℃CO2培养至40%~60%汇合时(汇合过分,转染后不利筛选细胞)。 (2)转染液制备:在聚苯乙稀管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)A液:用不含血清培养基稀释
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