Stage 1 预变性 A Cycle: 1 95 °C 30 sec
Stage 2 循环反应 B Cycle: 40 95 °C 10 sec
60 °C 30 sec
Stage 3 熔解曲线 C Cycle: 1 95 °C 15 sec
60 °C 60 sec
95 °C 15 sec
A:该预变性条件适合绝大多数扩增反应,如模板结构复杂,可将预变性时间延长至 3 min 提高预变性效果。
B:300 bp 以内的扩增子,延伸时间设置为 30 sec 即可;超过 300 bp 的扩增子,推荐延长延伸时间至 60 sec。