- ￥680
- lablead
- D0038-200T
- 2025年12月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
lablead
- 规格：
200T
货号：D0038-200T
存储条件：4℃避光保存，有效期见外包装。长期保存可以储存在-20ºC。
产品参数:Ex/Em: 480/520 nm（结合 dsDNA）
产品介绍
该试剂盒可用于 Qubit 仪器。Lab-Green II 双链DNA定量试剂盒是荧光检测dsDNA并进行定量的一种产品，这种检测方法非常灵敏。常用于分子生物学中cDNA文库的构建、亚克隆DNA片段的纯化及应用，如进行DNA定量、产物扩增和引物的进一步检测。常规的DNA含量检测方法是在260 nm处测其吸光值。这种方法的主要缺点是核苷酸、单链核酸和蛋白质对信号的影响很大，并且还会受到核酸制备过程中污染物的干扰，无法区分DNA和RNA，而且灵敏度低（5 μg/mL dsDNA溶液A260=0.1）。Lab-Green II 双链DNA定量试剂盒检测方法简单方便。
Lab-Green II 只有与dsDNA结合后才发出荧光，并且荧光强度与DNA浓度成正比。Lab-Green II双链DNA定量试剂盒可以检测出10 pg/μL-100 ng/μL范围内的dsDNA ，且线性关系较好(R2>0.99)。
实验步骤
1.试剂制备
Lab-Green II 以浓缩液形式保存在有机溶剂中。实验时，配制工作溶液：1× Lab-Green II 工作液，将组分A用组分B按1: 200的比例稀释，如20 mL组分B中加入100 μL组分A。由于试剂容易吸附到玻璃表面，需在塑料容器中配制。Lab-Green II 试剂见光易降解，注意避光保存。
2.实验方法
（1）准备足够量的 0.5 mL 的可用于 Qubit 仪器的 Ep 管。
注：Qubit 仪器适用 Ep 管为透明的薄壁 Ep 管，Ep 管的侧面不要做标记，以免影响荧光值采集。
（2）制定标准曲线。准备两个Ep管，每管加入190 µL配置好的1× Lab-Green II 工作液，再分别向两个Ep管中加入10 µL组分C和组分D，涡旋震荡2-3 s，震荡过程中不要产生气泡。
注：确保加入的组分C和组分D是10 µL，终体积为200 µL。
（3）添加一定量体积的1× Lab-Green II 工作液到待测样品中，确保最终体积为200 µL。
注：一般添加样品的体积为1-20 µL，相应的添加1× Lab-Green I I工作液的体积为199-180 µL。
（4）室温孵育2 min。
（5）读取数据，生成标准曲线，计算样品中DNA 的浓度。
注意事项
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
地点：中国农科院重大工程楼 107 为检验BioTeke公司实时荧光定量试剂（SYBR GreenⅠ）质量，本次实验分别采用国际知名的ABI公司（ABI Power SYBR Green PCR Master Mix）、TOYOBO公司（Realtime SYBR GreenⅠPCR Master Mix）和BioTeke公司产品进行实时荧光定量PCR分析，实验过程中除了荧光定量试剂Mix不同，其它反应条件（模板、引物和反应
（3） 在常规用酒精沉淀核酸的过程中，SUPER Green Ⅰ可以全部从双链核酸上去掉。 （4） 如果想对用 SUPER Green Ⅰ染过的胶进行 Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%～0.3% 的SDS。 （5） 在紫外照射透视下，与双链 DNA 接合的 SUPER Green Ⅰ呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。 （6） SUPER Green Ⅰ对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用
