CCCP溶液细胞凋亡诱导剂

流式细胞仪检测线粒体膜电位

和JC-1染色工作液，详见产品使用说明。稀释好的1× JC- 1 Assay Buffer保存在4°C。 2．阳性对照设置，详见产品使用说明；细胞按照实验方案进行凋亡诱导。 3．诱导完成后的细胞，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS轻轻重悬细胞并计数。 注：良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时，可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡，对实验结果可能存在不可控的影响，请谨慎处理。 4．取1-5 × 105重悬的细胞，300 g离心5 min，弃上清

Caspase活性检测系列（分光光度法）检测原理及操作指南

并混匀，注意避免气泡产生。 E、在加入Ac-特异性多肽-pNA混匀后，37℃孵育2~4 h。发现颜色变化较明显时即可测定OD405。如果颜色变化不明显可适当延长孵育时间，甚至可孵育过夜。 F、用酶标仪或分光光度计（100 μL比色皿）在λ=405 nm或400 nm测定样本吸光值。 G、通过计算OD样本值/OD阴性对照的倍数来确定凋亡诱导剂组Caspase 3的活化程度。 四、结果判断 Caspase的活性与AC-特异性多肽-pNA的分解量强弱成正比。 参考

流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多，流式细胞仪检测凋亡，是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此，具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下，首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体，线粒体的功能发生衰退；后是caspase家族激活，磷脂酰丝氨酸外翻，这时细胞的形态已经发生了改变，可以看到细胞变小，胞核皱缩；最后是细胞内DNA断裂，形成凋亡小体。在凋亡发生的各个过程当中，都有相应的流式细胞仪的检测方法，可以采用