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DH10B超级感受态细胞
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10×100μl/50×100μl
碧云天生产的DH10B超级感受态细胞,英文名DH10B Super Competent Cells,是一种可以用于高效克隆的E. coli DH10B即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,转化效率可以高达1×108cfu/μg DNA以上。
DH10B是实验室最为常用的大肠杆菌菌株之一,可用于常规基因克隆,更广泛应用于真核生物的基因组文库、cDNA文库构建、位点特异性突变等。
DH10B菌株的基因型为F- mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ∆M15 ∆lacX74 recA1 endA1 araD139 ∆(ara, leu)7697 galE15 galK λ-rpsL nupG。其中mcrA、mcrBC及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的真核生物DNA;recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取;φ80lacZ∆M15的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选[1];rpsL赋予其链霉素抗性。
-80℃保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。
感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞的转化效率。
待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。
感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。
通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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