碧云天生产的Tuner(DE3)超级感受态细胞,英文名Tuner(DE3) Super Competent Cells,是一种可以精确控制重组蛋白在所有菌体中均一化表达用的E. coli. Tuner(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,转化效率可以高达107cfu/μg DNA以上。
很多原核表达系统利用IPTG诱导重组蛋白在BL21菌株中完成表达,这种诱导具有随机效应, IPTG低浓度时只能在少数几个细胞中出现重组蛋白表达。要使所有细胞都表达,往往需要极高浓度的IPTG,且单个细胞内的重组蛋白水平差异较大。这种IPTG浓度带来的开-关效应让重组蛋白的得率难以控制。
Tuner(DE3)菌株解决了该弊端,确保了重组蛋白在所有细胞中均一化表达,且得率和IPTG的浓度呈现一定程度的正相关性。
Tuner(DE3)是lon和ompT蛋白酶缺陷型的B菌株,也是BL21菌株的lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突变株,此突变导致IPTG以均一速度进入体系中大肠杆菌的每个细胞,产生更加严格、均一的浓度依赖。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于Tuner的染色体上,所以称为Tuner(DE3),它可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,从而用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达。
Tuner(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdSB(rB-, mB-) gal dcm lacY1 (DE3) [1]。
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
D1091S |
Tuner(DE3)超级感受态细胞 |
10×100μl |
D1091M |
Tuner(DE3)超级感受态细胞 |
50×100μl |
- |
说明书 |
1份 |
保存条件:
-80℃保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
注意事项:
感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。
感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞的转化效率。
待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。
感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。
通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。