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100pmol/500pmol/2000pmol
| 规格: | 100pmol | 产品价格: | ¥268.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 500pmol | 产品价格: | ¥746.0 |
| 规格: | 2000pmol | 产品价格: | ¥1598.0 |
CRISPR-Cas系统作为原核生物的适应性免疫系统,广泛存在于细菌和古细菌中,能够保护其自身不受外源DNA或RNA的影响,是非常常用的基因编辑工具。完整的CRISPR-Cas系统包括介导识别DNA的CRISPR RNAs (crRNAs)和介导切割DNA的Cas核酸内切酶。
CRISPR-Cas12a系统是由Cas12a和gRNA (crRNA,仅需约40-44个碱基)组成。FnCas12a由gRNA引导至互补链,识别互补链上5'端富含T碱基(5'-TTN-3')的PAM (Protospacer adjacent motif)序列,然后Cas12a中的RuvC核酸内切酶结构域逐个切割互补链和靶链,以产生交错的DNA双链断裂,断裂发生在PAM序列3'端的约第18个碱基处,切割产物为5'端突出4或5个碱基的粘性末端(图1)。而CRISPR-Cas9系统是由Cas9和gRNA (crRNA和tracrRNA两个RNA分子融合而成)组成,Cas9在gRNA的引导下,识别3'端富含G碱基(5'-NGG-3')的PAM序列,并且Cas9需要使用HNH和RuvC两个核酸酶结构域协同切割DNA,断裂通常发生在PAM序列5'端的第3个碱基处,最终产生平末端。
图1.碧云天Cas12a核酸酶序列识别与DNA切割示意图。
碧云天基于自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的FnCas12a, 来源于Francisella novicida U112。FnCas12a识别含有TTN的PAM序列,并且FnCas12a的切割位点相对远离其识别位点为多次编辑提供了可能性,这些特点使Cas12a与Cas9可以互为补充。只需简单将guide RNA (gRNA)与Cas12a蛋白相结合,由于该gRNA仅含有crRNA,无需trans-activating crRNA (tracrRNA)即可实现基因编辑的目的
产品特点:
1.基因编辑效率高:FnCas12a (Cpf1)酶的C端融合了核定位信号(Nuclear localization signal, NLS),NLS有助于FnCas12a进入细胞后定位至细胞核,从而提高基因编辑的效率;
2.脱靶效应低:研究表明与Cas9相比,Cas12a更有效精确;
3.酶活性高:产品效果见图2。
产品效果:
图2.碧云天和N公司的Cas12a酶活性检测对比效果图。如图所示,本产品与N公司的Cas12a具有相近的酶活性。
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文献和实验ELATNESCLASRETSFITNG HCLASGKTSF MTTLCLRSIY EDLKMYHVEF QAMNAKLLMDPKRQIFLDQN MLAAIAELMQ ALNFDSETVP QKPSLKELDF YKTKVKLCILLHAFRIRAVT IDRMMSYLSS S2, FeaturesDL-IL12A-Ra大鼠白介素 12A (IL12A) 酶联免疫吸附检测试剂盒预期应用本试剂盒运用双抗体夹心 ELISA 法定量测定大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中 IL12A
北大伊成器团队 Nature Method 发文,揭示单碱基编辑脱靶风险!
链的脱靶编辑呈现相关。尽管有了这些数据,作者发现对 CBE 脱靶效应的预测依旧非常困难。 最后,研究团队对 YE1 以及 Cpf1 (Cas12a)-BE 等其他 CBE 工具进行了类似的评估。尽管 BE4max-YE1 表现出了更少的脱靶编辑,但依旧有巨大的提升空间。而基于 Cas12a 的碱基编辑工具,在 Detect-seq 中呈现出了更多的脱靶突变。这些数据再次说明了 Detect-seq 是一个有效的 CBE 脱靶效应研究工具,也表明了我们的基因编辑工具还需要进一步完善。 研究
系统 (clusteredregularlyinterspacedshortpalindromicrepeats/CRISPR-associatedCas9,CRISPR/Cas9system) 和 CRISPR/Cpf1 系统。这些 SSNs 的共同特点是都能在基因组特定部位精确切割 DNA 双链,造成 DNA 双链断裂 (DNAdouble-strandbreaks,DSBs);而 DSBs 能够极大地提高染色体重组事件发生的概率。DSBs 的修复机制在真核生物细胞中高度保守,主要包括同源重组 (homology-directedrepair,HDR) 和非同源末端连接 (non
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