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- 详细信息
- 技术资料
- 英文名:
CTLL-2
- 库存:
990
- 供应商:
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
- 肿瘤类型:
详见说明
- 细胞类型:
其他类型
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
详见说明
- 相关疾病:
详见说明
- 物种来源:
小鼠
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
详见说明
- 运输方式:
常温或者干冰运输
- 年限:
不限
- 生长状态:
悬浮细胞
- 规格:
1*10^6cells/T25方瓶
CTLL-2小鼠T淋巴细胞
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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CTLL-2小鼠T淋巴细胞
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细胞别称
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CTLL-2;CTLL2; CTLL(2);小鼠T淋巴细胞
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商品货号
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ORC0617
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种属来源
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小鼠
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年龄性别
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T细胞
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组织来源
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生长特性
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悬浮生长
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细胞形态
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淋巴母细胞样
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背景简介
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CTLL-2细胞源自C57BL/6的细胞毒性的T淋巴细胞,是一株具有细胞毒作用的IL-2依赖型的T-细胞株。
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生物安全等级
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1
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细胞规格
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1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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支原体检测
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无
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基因表达情况
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保藏机构
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ATCC; TIB-214 DSMZ; ACC-27 ECACC; 93042610
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培养基
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RPMI-1640+10% FBS+100IU/ml IL2或mouseIL2+1% P/S
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培养条件
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气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
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冻存条件
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无血清冻存液,液氮储存
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倍增时间
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特别注意
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1、该细胞复苏第一、二天死亡下降到10%正常,一般第四天恢复。
2、细胞一三五传代,按0.02M/ml-0.02M/ml-0.015M/ml 铺瓶
3、需及时传代,密度超过0.5M/ml,24H后细胞大量死亡
4、最高养4个月,约传代50次
5、冻存密度应达到6-10M/管
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二、细胞培养操作
1) 复苏细胞:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL 20%FBS含200IU IL2的培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3-5 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液(培养基补足到10ml,加入100IU IL2)并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按0.02M/ml的密度分到含新培养基的新皿中或者瓶中。
在IL2充分的情况下,细胞生长旺盛,隔天细胞数翻10倍以上,需及时传代,密度超过0.5M/ml,24H后细胞大量死亡。
3) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
三、培养注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象 发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需 细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由 客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分细胞由于温度 变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将 T25 瓶置于 37℃培养箱放置 2-4h。
4. 贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,弃上 清。加 5 mL PBS 重悬细胞,再 900 rpm-1000 rpm 离心 3 min,,用新鲜的完全培养基重悬 细胞,并接种到新的培养瓶或培养皿中,置于培养箱中进行培养。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和我司技术部沟通 交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞 的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7. 该细胞仅供科研使用。
8. 备注:运输用的培养基 (灌液培养基) 不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培 养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 1:2 传代 。
9. 注意: 1:2 传代就是 1 个 T25 瓶传 2 个 T25 瓶或者 2 个 6cm 皿。不是 1 个 T25 瓶传 2 个10cm 皿。
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