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文献和实验galaxyzj 我有一个真核表达载体,包含一个Iba1启动子,来源于巨噬细胞的特异性基因Iba1,因此是个组织特异性的启动子,用来控制GFP的表达。启动子的结构见图1,其中加框部分是外显子序列。载体的结构见图2。 载体的构建人说,这个载体的开放阅读框起始是Iba1基因自身的ATG,也就是图1里面Exon1内部加了下划红线ATG,GFP的起始密码ATG也是在一个读码框内。因此,这个载体最后表达GFP蛋白,并且N端融合了Iba1的外显子编码的17
Cell Reports Methods|脑类器官“不够真”?加上微胶质和血管后,胶质瘤放疗反应变了
collagen IV、S100β、ZO-1 和 PDGFRβ 等血管/血脑屏障相关标志。移植到免疫缺陷小鼠后,这些人源 CD31⁺ 血管样结构可被 FITC-dextran 灌注,并可见周细胞覆盖,显示其具有一定功能化潜力。 3. CCO 中微胶质样细胞具备表型和功能特征 CCO 中出现 Iba1⁺ 微胶质样细胞,并共表达 P2RY12、CD11b、CX3CR1 等微胶质相关标志。Iba1⁺ 细胞内可见 PSD95 信号,结果显示其具有吞噬突触成分的功能特征。 4. CCO/GSC 共培养可重现
元 CaMKIIα 星形胶质细胞 GFAP、GfaABC1D 小胶质细胞 F4/80、Iba1、CD68 少突胶质细胞 CNP、MBP GABA能神经元 GAD67、GAD65 此外,胆碱能神经元、神经干细胞、脑血管内皮细胞等方向也需要根据目标细胞匹配相应启动子。 以上为选型参考,不是主要方案。具体仍需结合血清型、脑区、递送方式和研究模型判断。 3. 为什么启动子和血清型不能分开看? 启动子决定表达偏向,血清型影响组织与细胞转导。单独比较血清型往往不足以确定最终方案。 更实用的逻辑
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