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文献和实验min。②荧光素的准备 根据欲标记的蛋白质总量,按每毫克免疫球蛋白加0.01mg荧光色素,用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末。也可用下述公式计算出免疫球蛋白、荧光素的量,还可以算出需加缓冲液的量。a.蛋白溶液:含量Amg/m1;容积Bml。b.总蛋白量(AXB)=Crag。c.C/20~C/10=Dmg(如蛋白含量低于20mg/ml,用C/10;如高于20mg/ml,用C/20)。d.荧光素FITC的量:(1/50~2/100)XC=Emg。e.巳0.5mol/L(pH9.5)碳酸盐缓冲
Use of the B.D. FACS or Calibur Flow Cytometers
should be repeated for the remaining photomultiplier tubes: FL1: FITC, GFP, YFP, Hoechst FL2: Phycoerythrein (PE), Propidium Iodide (DNA content) FL3: TriColor, Propidium Iodide (viability) FL4: DAPI (LSR machine) Note if you are using P.I. for a DNA
荧光素FITC标记抗体的方法(Marsshall法、Chadwick法、改良法、透析标记法)
总蛋白量(AXB)=Crag。 c.C/20~C/10=Dmg(如蛋白含量低于20mg/mL,用C/10;如高于20mg/mL,用C/20)。 d.荧光素FITC的量:(1/50~2/100)×C=Emg。 e.巳0.5mol/L(pH9.5)碳酸盐缓冲液D/10=FmL。 f. PBS量D-(B+F)=GmL。 注:A为蛋白含量,mg/mL;B为蛋白质溶液的容积;C为蛋白总量,mg;D为常数,mg;正为荧光素的量,mg;F为碳酸
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