- ￥1500 - 3800
- 上海莼试
- 537
- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
莼试生物
- 库存：
38
- 英文名：
说明书
- 规格：
T25瓶
| 产品名称 | 规格 | 形态 |
| J774A.1(小鼠单核巨噬细胞) | T25瓶 | 单核细胞、巨噬细胞样 |
细胞别称：J-774A.1; J774.A1; J774 A1; J774A.1; J 774A.1; J774 A.1
细胞简介：J774A.1细胞是1968年从患有网状细胞肉瘤的成年雌性 BALB/cN小鼠腹水中分离的。J774A.1细胞有抗体依赖的吞噬作用，生长受硫酸葡聚糖、PPD和LPS的抑制。J774A.1细胞可产生IL-1β和大量的溶菌酶。
细胞形态：单核细胞、巨噬细胞样
生物安全等级：1
收录：ATCC
来源：巨噬细胞；癌细胞；BALB/c
培养条件：DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境：空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5%
培养操作:
换液周期：2-3天
培养基体积：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例：1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法：1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项：不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
冻存操作:
冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格：200-300万/ml，1ml每管
冻存方法：1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
优势：
①品种丰富，拥有人、大鼠、小鼠、狗、猪、鸡等600多种细胞
②在库人源细胞系提供STR鉴定报告， 鼠源细胞系提供种属鉴定报告
③细胞在库传代次数5代以内，代次低，状态好， 活性高
④进口品质，国产价格，性价比高
⑤现货发售，并全程免费提供专业的技术指导，保您售后无忧
处理方法：
收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：
1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。
3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。
4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。
5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。
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文献和实验单核/巨噬细胞的分化成熟及组织分布 单核／巨噬细胞均来源于骨髓干细胞。发育成单核细胞后，进入血流分布于各种器官组织，并有不同的命名。如图2-12 单核巨噬细胞的组织分布 成熟的单核吞噬细胞表达多种表面分子．其中受体多达数十种，如免疫球蛋白的Fc受体FcyRI(CD64)、FcγRⅡ(CD32)、FcγRⅢ(CDl6)，补体受体CRl和CR3和各种模式识别受体(包括甘露糖受体、清道夫受体、TLR)，以及多种细胞因子、激素、神经肽、多糖、糖蛋白和脂蛋白的受体(图2―13)，介导单核／
RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢，普通的方法根本就不可能将它消化下来，这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得，简介如下：消化液：0.5％胰酶、0.2％EDTA，实验前加温到37度以50ml培养瓶为例：1、细胞贴壁生长，长满瓶底80％时，弃去培养液，加D-HANKS 漂洗 两次；2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1－2ml,消化37℃约2-5min，镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化，弃消化液加D-HANKS 漂洗两次；3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
・ Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab) Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from anticoagulated venous blood are isolated by layering onto histopaque
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