HFF-1(人皮肤成纤维细胞)

实验操作步骤：  
a．采用认可的方案处死啮齿动物。    
b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。  
c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。   
d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。   
e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。   
f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。
商品属性：

产品名称	规格	形态
HFF-1(人皮肤成纤维细胞)	T25瓶	成纤维细胞样

商品介绍：

基本属性	细胞名称：HFF-1(人皮肤成纤维细胞) 细胞别称：HFF1 细胞简介：HFF-1细胞是从新生儿包皮中分离建立，可用作饲养层细胞，用于支持胚胎干细胞的生长或维持胚胎干细胞的未分化状态。HFF-1细胞是有限传代细胞系。 细胞形态：成纤维细胞样 生物安全等级：1 收录：ATCC 来源：包皮；男性 培养条件：成纤维细胞培养体系 培养环境：空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5%
培养操作	换液周期：2-3天 培养基体积：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml 传代比例：1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） 传代方法：1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； 注意事项：不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
冻存操作	冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); 冻存规格：200-300万/ml，1ml每管 冻存方法：1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
 

 
注意事项：
1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。
2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，
避免开盖时试剂损失。
3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗
并彻底清除残留清洁剂。
6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
TPX2  微管相关同源蛋白TPX2抗体 规格: 0.2ml
ZNF693/CASZ1  锌指蛋白693抗体 规格: 0.2mlID4  DNA结合抑制因子4抗体 规格: 0.1ml
NHLRC1  肌痉挛性癫痫相关EPM2蛋白抗体 规格: 0.2mlMESP1  心管发育中胚层相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
Phospho-p63 (Ser395)  磷酸化P63瘤抑制基因抗体 规格: 0.1mlphospho-SCNN1B(Ser633)   磷酸化上皮钠通道β2抗体 规格: 0.1ml
thrombin II  凝酶Ⅱ(凝因子II)抗体 规格: 0.1mlSMARCA2/BRM  ATP依赖解旋酶SMARCA2抗体 规格: 0.2ml
MFSD12/C19orf28  19号染色体开放阅读框28抗体 规格: 0.2mlphospho-CREB-1(Ser129)  磷酸化CREB-1抗体 规格: 0.1ml
UQCRC1  辅酶细胞色素C还原酶核心蛋白1抗体 规格: 0.2mlTRIM6/RNF89  环指蛋白89 规格: 0.2ml
Thrombospondin 2  小板反应蛋白2/凝酶敏蛋白2抗体 规格: 0.2mlLDHD  酸脱酶D抗体 规格: 0.2ml
MRP8/ABCC11  多药耐药相关蛋白8抗体 规格: 0.2mlFlotillin 1  脂阀结构蛋白1抗体 规格: 0.2ml
PCDHGB4  原钙粘蛋白γB4抗体 规格: 0.2mlEphrin A2/LERK6  Ephrin A2抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/RBITC  罗丹明标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.3mlPAI-1  纤溶酶原激活物抑制因子抗体 规格: 0.1ml
IGSF10  免疫球蛋白超家族成员10抗体 规格: 0.2mlHSP90 β  热休克蛋白90β 抗体 规格: 0.2ml
phospho-c-Raf (Ser289)  磷酸化原基因c-Raf抗体 规格: 0.1mlMS4A3/CD20L  CD20样蛋白抗体（造干细胞4跨膜蛋白3） 规格: 0.2ml
HFF-1(人皮肤成纤维细胞)显色光学显微镜检测试剂盒   0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Endotoxin
冰冻切片组织脘蛋白（PRION）蛋白表达NBT  10/20次 0.156-10 ng/mL 猪疱疹病毒(PHV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
显色光学显微镜检测试剂盒   78-5000 pg/mL 人背板同源蛋白ELISA试剂盒
石蜡切片组织脘蛋白（PRION）蛋白表达NBT  10/20次 31.2-2000 pg/mL (Folic acid)ELISA试剂盒
显色光学显微镜检测试剂盒   0.312-20 ng/mL 肠道病毒EV71核酸检测试剂盒(RT-PCR法)
细胞脘蛋白（PRION）蛋白表达比色法定量检测试剂盒  10/50 次 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Amine oxidase [flavin-containing] B
氯仿法DNA萃取试剂盒  100次 0.156-10 ng/mL 人钙/钙调蛋白依赖性蛋白激激2(CaM-kinase kinase 2)ELISA试剂盒
细胞脘蛋白（PRION）蛋白表达荧光定量检测试剂盒  10/50 次 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human T-cell surface glycoprotein CD3 gamma chain
乙醇沉淀法DNA萃取试剂盒  20次 78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Ovostatin homolog 2
SDS蛋白DNA萃取试剂盒  50次 15.6-1000 pg/mL 人补体成分5(C5)ELISA试剂盒
异丙醇沉淀法DNA萃取试剂盒  50次 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase A
快速盐析法DNA萃取试剂盒  50次 0.312-20 ng/mL 人溶体保护蛋白(Lysosomal protective protein)ELISA试剂盒