测定意义 乙酰辅酶 A 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中 产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、 蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶 A 汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸 化,经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水,释放能量用于 ATP 合成。此外,乙酰辅酶 A 是合成脂肪酸,酮体,胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。
测定原理 苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和 NAD 生成草酰乙酸和 NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶 A 和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶 A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应,乙酰辅酶 A 含量和 NADH 的生成速率成正比,340nm 下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶 A 含量的高 低。