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6磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6PGD
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85
6PGDH
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1年
优利科(上海)生命科学有限公司
2-8℃
50管/48样/100管/96样
粗酶液提取:1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (10 4个):提取液体积(mL)为 1000~5000:1 的比例(建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 测定操作: 1. 酶标仪预热 30min,调节波长到 340 nm。2 将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解;在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种) 水浴 10min 以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。3. 取 96 孔板,依次加入 10μL 样本 190μL 试剂一,于 340nm 处测定 3min 内吸光值变化, 第 10 s 吸光值记为 A1,第 190s 吸光值记为 A2。△A=A2-A1注意:空白管只需要做一次。
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85 人阅读发布时间:2022-05-07 18:51
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