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6磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH
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G6PDH
/
1年
优利科(上海)生命科学有限公司
2-8℃
50管/48样/100管/96样
样本的前处理:1、细菌、细胞或组织样品的制备: 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量 (104个):提取液体积(mL)为 1000~5000:1 的比例(建议 2000 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织, 加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。2、血清(浆)样品:直接检测。测定步骤:1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。2、 将试剂二和试剂三转移至试剂一中充分溶解;在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种) 水浴 10min 以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。3、 在 1mL 石英比色皿中加入 50μL 样本和 950μL 试剂一,混匀后立即记录 340nm处 1min 后吸光值 A1 和 6min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。 注意:若 ΔA 大于 0.5,需将酶液用提取液稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。或将反应 时间缩短至 2min,使 A2-A1 小于 0.5,可提高检测灵敏度。
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85 人阅读发布时间:2022-05-07 18:51
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