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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海信帆生物科技有限公司
- 检测方法:
酶联免疫法
- 适应物种:
人,小鼠,大鼠等
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清,血浆,组织
- 规格:
48T,96T
ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。
检测原理 试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被大鼠透明质酸酶(HAase)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠透明质酸酶(HAase)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
操作步骤
1. 从室温平衡60min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;
4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:最低检测浓度小于1.0ng/ml。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
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