细胞滤网

检测细胞增殖，你的方法用对了吗？

液：用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液（1000×）RPMI 1640 完全培养基：RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏，研磨成单细胞悬液，用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞，将细胞过 40 μm 细胞滤网后，进行细胞计数。样本清洗液洗涤（可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替），1 500 rpm 离心 5 min，用 PBS 重悬，调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE

人类滑膜原代细胞培养

震动混匀数次）；5、30分钟后收集第一管细胞：细胞悬液经70μm细胞滤网过滤，用1500-2000转离心6分钟，上清为Ⅰ型胶原酶加入未过滤网的组织，继续用于消化；6、离心管底细胞用α-MEM离心洗涤2次，每次用α-MEM重悬浮后用1500-2000转，离心6分钟，最后一次用记数板观察到有细胞。细胞最终悬浮于含有10%胎牛血清的α-MEM中，接种到培养瓶中培养。7、60钟后收集第二管细胞：细胞悬液经70μm细胞滤网过滤，用1500-2000转离心6分钟；用α-MEM洗2次，每次用α-MEM重悬浮后用

PriCells: 正常人原代角膜间质细胞的分离

手术刀或单刃的安全刀片； 11. 细胞滤网，70μm血液尼龙过滤网； 12. 塑料刮片，“Cell Lifter”或“Cell Scraper”； 13. 弯虹膜剪，11cm（4-3/8in）； 14. Jeweler’s镊，10cm（4in）； 15. 角膜剪，19mm刀刃，尖头； 16. Colibri缝纫钳，0.1mm； 17. SDS样本缓冲液，使用终浓度：0.058mol/L Tris，5%丙三醇，1.67% SDS，0.02%溴酚蓝； 18. PriCells原代