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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Necrosis vs Apoptosis Assay Kit
- CAS号:
Necrosis vs Apoptosis Assay Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
齐源生物
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100 Tests/200 Tests
| 规格: | 100 Tests | 产品价格: | ¥5280.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200 Tests | 产品价格: | ¥9680.0 |
产品介绍:
坏死与细胞凋亡检测试剂盒可同时检测细胞凋亡相关的细胞毒性事件以及坏死引起的细胞死亡。这个简单直接的工具让研究人员能够了解他们细胞群的整体健康状况。此外,该试剂盒对于研究其新型药物或治疗效果的研究人员非常有用,因为它允许他们评估实验结果并评估细胞的整体治疗效果。使用荧光显微镜或流式细胞仪分析荧光信号。
评估化学和生物制剂的潜在细胞毒性是安全分配与食品配方相关的药物、疫苗或添加剂的强制性要求。
坏死与细胞凋亡检测试剂盒可同时检测细胞凋亡相关的细胞毒性事件以及坏死引起的细胞死亡。
FLICA 试剂探针鉴定凋亡细胞。FAM-FLICA 探针共价结合活性半胱天冬酶,在细胞凋亡过程中上调,从而清楚地标记凋亡细胞以供后续分析。非凋亡细胞将不包含 FAM-FLICA 在细胞结构内保持共价结合所需的活性半胱天冬酶。细胞膜完整性的丧失,表明坏死或晚期细胞凋亡,使用活体染色染料 7-氨基放线菌su D (7-AAD) 进行检测,这是一种红色荧光活/死染色剂。这种染料很容易穿透细胞膜受损的细胞,与 DNA 的富含 GC 的区域紧密结合。由于单独使用 7-AAD 可能无法检测细胞凋亡的早期阶段,因此必须将其与绿色荧光 FAM-FLICA 细胞凋亡检测试剂结合使用。
在一次测试中结合这两种不同类型的荧光细胞状态指示剂试剂可以揭示相当大比例的 7-AAD 阴性(膜完整活细胞)但 FAM-FLICA 阳性(凋亡)的细胞。与 DNA 中富含 GC 的区域紧密结合。
由于单独使用 7-AAD 可能无法检测细胞凋亡的早期阶段,因此必须将其与绿色荧光 FAM-FLICA 细胞凋亡检测试剂结合使用。在一次测试中结合这两种不同类型的荧光细胞状态指示剂试剂可以揭示相当大比例的 7-AAD 阴性(膜完整活细胞)但 FAM-FLICA 阳性(凋亡)的细胞。与 DNA 中富含 GC 的区域紧密结合。
由于单独使用 7-AAD 可能无法检测细胞凋亡的早期阶段,因此必须将其与绿色荧光 FAM-FLICA 细胞凋亡检测试剂结合使用。在一次测试中结合这两种不同类型的荧光细胞状态指示剂试剂可以揭示相当大比例的 7-AAD 阴性(膜完整活细胞)但 FAM-FLICA 阳性(凋亡)的细胞。
试剂名称 :FAM-VAD-FMK, 7-AAD
目标 :Caspases,富含 GC 的 DNA
激发/发射 :FAM-FLICA – 492 nm / 529 nm 7-AAD – 546 nm / 647 nm
分析方法 :流式细胞仪、荧光显微镜
样本类型 :细胞培养
贮存 :2-8℃
操作步骤:
1、准备样品和对照
2、用 diH2O 按 1:10 稀释细胞凋亡洗涤缓冲液。
3、用 50 µL DMSO 重构 FAM-VAD-FMK。
4、通过添加 200 μL PBS 稀释 FLICA 1:5。
5、在 1:30 时将稀释的 FLICA 添加到每个样品中(例如,将 10 µL 的稀释 FLICA 添加到 290 µL 的样品中)。
6、孵育约 1 小时。
7、去除培养基,然后洗涤细胞:加入 1X 细胞凋亡洗涤缓冲液并旋转细胞(两次)。
8、在 400 µL 1X 细胞凋亡洗涤缓冲液中重悬样品
9、用 260 µL DMSO 重构 7-AAD
10、以 1:200 的比例向每个样品中添加 7-AAD(例如,将 2 µL 添加到 400 µL 样品中)
11、使用荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。FAM-VAD-FMK 在 492 nm 激发并在 529 nm 发射。7-AAD 在 546 nm 激发并在 647 nm 发射。
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
而细胞发生程序性死亡时,就像树叶或花的自然凋落一样,凋亡的细胞散在于正常组织细胞 中,无炎症反应,不遗留瘢痕。死亡的细胞碎片很快被巨噬细胞或邻近细胞清除,不影响其他细胞的正常功能。 细胞凋亡和细胞坏死的区别 区别点 细胞凋亡 细胞坏死 起因 生理或病理性 病理性变化或剧烈损伤
Kerr( 1972)最先提出凋亡的概念,与细胞坏死的区别是:• ①细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体;• ②凋亡小体内有结构完整的细胞器;• ③不引起炎症;• ④线粒体无变化,溶酶体活性不增加;• ⑤内切酶活化,DNA有控降解,凝胶电泳图谱呈梯状;• ⑥凋亡通常是生理性变化,而细胞坏死是病理性变化。细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)是一种基因指导的细胞自我消亡方式。• PCD和细胞凋亡的区别在以下方面:PCD是功能性概念,凋亡是形态学概念。PCD的最终











