- ￥5776 - 10400
- 齐源
- 972
- 进口/国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Total Cytotoxicity Test Assay Kit
- CAS号：
Total Cytotoxicity Test Assay Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
齐源生物
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
125 Tests/250 Tests
| 规格： | 125 Tests | 产品价格： | ￥5776.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 250 Tests | 产品价格： | ￥10400.0 |
总细胞毒性检测试剂盒是一种单管三色检测试剂盒，用于定量评估细胞凋亡和坏死引起的细胞介导的细胞溶解活性。该测定采用绿色荧光细胞染色剂 CFSE 标记靶细胞，红色活/死活力染料 7-AAD 用于识别细胞毒性测定样品中存在的死细胞，以及橙红色 SR-FLICA 试剂 SR-VAD- FMK 用于测量目标细胞群中的半胱天冬酶活性。使用流式细胞仪分析您的结果。
细胞溶解活性是消除细胞内病原体和癌细胞的重要过程。总细胞毒性检测试剂盒可让您评估细胞培养物中的细胞溶解活性。总细胞毒性检测试剂盒包括三种荧光试剂：CFSE、7-AAD 和 SR-FLICA。CFSE 是一种绿色荧光膜染色剂，用于识别目标细胞群。添加未染色的效应细胞并与靶细胞一起孵育。SR-LFICA 试剂与细胞一起孵育以鉴定含有活性半胱天冬酶的细胞。然后添加 7-AAD，一种红色荧光活/死染色剂，通过与膜受损细胞的 DNA 结合，将所有坏死细胞染成红色。通过流式细胞术，量化四种细胞群：活细胞、早期凋亡细胞、晚期细胞凋亡细胞和坏死细胞。
试剂名称 ：7-AAD、CFSE、SR-VAD-FMK
目标 ：细胞介导的细胞毒性，聚半胱天冬酶
激发/发射 ：7-AAD – 546 nm / 647 nm CFSE – 492 nm / 520 nm SR-FLICA – 565 nm / 600 nm
分析方法 ：流式细胞仪
样本类型 ：细胞培养
贮存 ：CFSE 在 ≤ -20°C，其他成分在 2-8°C
操作步骤：
1.准备样品和对照
2.用 diH2O 按 1:10 稀释检测缓冲液并过滤灭菌。
3.用 200 µL DMSO 重构 CFSE，并用 1X 检测缓冲液按 1:250 稀释。
4.将 200 µL CFSE 添加到目标细胞中，将它们染成绿色，并在室温下孵育 15 分钟。
5.清洗靶细胞并调整细胞浓度。
6.将效应细胞加入靶细胞并孵育 4-6 小时。
7.用 100 µL DMSO 重构 SR-FLICA 并稀释 1:12.6。
8.加入 10 µL SR-FLICA 将凋亡细胞标记为橙红色，并在 37°C 下孵育 45 分钟。
9.用 260 µL DMSO 重构 7-AAD，并用 1X 检测缓冲液按 1:10 稀释。
10.添加 20 µL 7-AAD 将坏死细胞标记为红色，并在冰上孵育 10 分钟。
11.运行控制并使用流式细胞仪进行分析。通过分析 FL-1（绿色）与 FL-3（红色）来识别目标细胞。创建 FL-2（橙红色）与 FL-3（红色）的图。CFSE 在 492 nm 激发并在 520-540 nm 发射；7-AAD 在 546 nm 激发并在 647 nm 发射；SR-FLICA 在 565 nm 激发并在 600 nm 发射。
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文献和实验CCK 试剂盒，为 MTT 法的替代方法，是一种基于 WST（水溶性四唑盐，化学名：2 -（2 - 甲氧基 - 4 - 硝苯基）- 3 -（4 - 硝苯基）- 5 -（2,4 - 二磺基苯）- 2H - 四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。CCK 法与其它检测方法之间的比较
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】，在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
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