- ￥3990
- 博尔森/BIOESN
- BES234776P
- 中国
- 2026年03月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
50
- 英文名：
Chryseobacterium meningsepticum
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海博尔森生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50次
【包装规格】50T/盒
【预期用途】
脑膜炎败血金黄杆菌，在PCR反应体系中加入荧光基团，随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环收集一个荧光强度信号，通过荧光强度变化检测产物量的变化，最终得到得到一条荧光扩增曲线图，扩增曲线横坐标表示循环数，纵坐标表示荧光强度，其检测结果仅供参考。本产品不提供活体样品做阳性对照，仅提供人工合成的特异性 DNA 片段标准品作为阳性对照，仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗用途。
【检验原理】
本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，针对脑膜炎败血金黄杆菌的基因高度保守区域设计特异性引物，用荧光 PCR 技术对脑膜炎败血金黄杆菌的核酸进行体外扩增检测，在反应体系中含脑膜炎败血金黄杆菌核酸模板的情况下，PCR 反应得以进行并释放荧光信号，利用仪器对 PCR 过程中相应通道的信号强度进行实时监测和输出，实现检测结果的定性、定量分析。
【试剂组成】
| 名称 | 规格 |
| 脑膜炎败血金黄杆菌扩增液 | 25μL×1管 |
| 脑膜炎败血金黄杆菌反应液 | 975μL×1管 |
| 脑膜炎败血金黄杆菌阳性质控品 | 50μL×1管 |
| 脑膜炎败血金黄杆菌阴性质控品 | 50μL×1管 |
| 说明书 | 1份 |
2）试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。
【储存条件及有效期】
-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融少于 7 次，有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI 、MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
自备：无 DNA/RNA 酶的 1.5mL 离心管，0.2mL PCR 反应管，滤芯吸头(规格:10μL，200μL，1000μL)，离心机，振荡混合器，各种规格的移液器。
【样品要求】
1. 根据实际情况，病死或扑杀的牛，无菌剪取肠道等样品，活畜取全血、血清血浆、粪便、呕吐物、口腔鼻咽呼吸道分泌物、咽喉部鼻孔眼部和肛门拭子和病毒培养物作为检测样本。
2. 应避免样本间交叉污染，样本采集后应及时检测，也可保存于-20±5℃待检，长期保存应置于-70℃以下。
【样品保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。
【使用方法】
1. 样品处理（样本处理区）
1.1 样本前处理
按照试剂盒操作说明或者微生物样品处理方法做好样品前处理。
1.2 DNA 提取
根据您实验室的具体情况和样品类型，选择适当的提取策略方法。为了使实验结果稳定、有效、可靠，我们建议使用商品化的试剂盒进行提取，严格按照对应试剂盒说明书进行操作，样本核酸提取过程中应避免污染，提取好的模板样品如不能立即检测，建议-15℃以下保存。
推荐采用我们公司研发生产的试剂盒：Hypure 病毒基因组 DNA 提取试剂盒
2. 试剂配制（试剂准备区）
2.1 从-15℃以下冰箱中取出试剂盒平衡到室温（20～25℃），注意避免强光照射，待完全溶解后振荡混匀并低速离心 10 s，使用低吸附吸头分液取样，避免试剂损失和
浪费。
2.2 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 7 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：
| 试剂 | 脑膜炎败血金黄杆菌反应液 | 脑膜炎败血金黄杆菌扩增液 |
| 用量（样本数为N） | 19.5μL | 0.5μL |
2.4 盖紧八联 PCR 反应管盖, 并注意做好相应标识（请标记在八联 PCR 反应管盖两端突出部位，切勿标记在八联 PCR 反应管盖中间，以免影响信号采集）。将 PCR 反应管转移至样本准备区，剩余试剂放回-15℃以下冰箱冷冻保存。
3. 加样（样本处理区）
将步骤 1.2 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心，核酸加样过程中应避免污染。
4. PCR 扩增（核酸扩增区）
4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内, 并记录放置顺序。
4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25 μL；
荧光通道选择：检测通道选择 FAM， 淬灭通道选择 NONE，参比荧光选 NONE。
4.4 推荐循环参数设置：
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 3min | 否 |
| 2 | 40 cycle | 95℃ | 15sec | 否 |
| 55℃ | 30sec | 否 |
5.1 结果分析条件设定
设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。
5.2 结果判断
阳性：检测通道 Ct 值≤35.0，且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑：检测通道 Ct 值>35.0，且出现典型扩增曲线的样本建议重复试验，重复试验结果出现 Ct 值≤38.0 和典型扩增曲线者为阳性，否则为阴性。
阴性：检测结果 Ct 值无 Ct 值，无明显的扩增曲线。
6. 质控标准
阴性质控品：无明显扩增曲线或无 Ct 值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且 Ct 值≤30；
以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
7. 产品性能指标
阴阳性参考品符合率：5 份阳性参考品符合率为 100％；10 份阴性参考品符合率为 100％。
最低检测限：1.0×103copies/mL。
精密度：批内、批间精密度检测 Ct 值的变异系数（CV）均小于等于 3%。
8. 检测方法的局限性
Ø 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
Ø 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
Ø 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
Ø 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
Ø 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
Ø 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
Ø 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
9. 注意事项
Ø 所有操作严格按照说明书进行；
Ø 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
Ø 反应液应避光保存；
Ø 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
Ø 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
Ø 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
Ø 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
Ø 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
【厂家信息】：
Ø 公司名称：上海博尔森生物科技有限公司
Ø 网址：www.bioesn.net
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文献和实验。 阪崎肠杆菌是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。由其引发的婴儿、早产儿脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎散发和暴发的病例已在全球相继出现。多份研究报告表明婴儿配方奶粉是当前发现致婴儿、早产儿脑膜炎、败血症和坏死性结肠炎的主要感染渠道,在某些情况下，由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40%～80%。阪崎肠杆菌已引起世界多国相关部门的重视。据报道,国外乳业巨头曾因此被召回.在美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司
布兰汉菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌科菌种、假单胞菌属菌种、脑膜败血性金黄杆菌无色杆菌属、拟杆菌属种 尿液 金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌属、链球菌属、棒状杆菌属、分枝杆菌属、真菌 淋病奈瑟菌、肺炎克雷伯菌、沙雷菌属、大肠埃希菌、变形杆菌属、肠杆菌属、沙门菌属、假单胞菌属 下呼吸道标本（痰液） 金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、A群链球菌、厌氧球菌、结核分枝杆菌、白喉
染色法 （一）切片 （二）染色 三、ICC在细胞功能研究中的作用 四、ICC在原位杂交技术中的应用 第五章 免疫金银及铁标记技术 第一节 免疫金技术发展史 第二节 溶胶的基本概念 一、胶体金 （一）离子分散体系 （二）胶体分散体系 （三）粗分散体系 二、胶体金的一般性状 （一）胶体金的颜色 （二）胶体金的稳定性 （三）溶胶的聚沉现象 第三节 胶体金的制备方法 一、制备胶体金的准备 （一）玻璃器皿的清洁 （二）试剂的配制要求 二、制备胶体金的方法和步骤 （一）白磷还原
