手机验证
抚生
48T
用途
该试剂盒用于体外定量检测血清、血浆或其他相关生物液体中浓度。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的抗原会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗体与结合在包被抗体上的抗原结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中指标的浓度。
反应类型 | 夹心法 |
规格 | 96T |
反应时间 | 4.5h |
反应性 | 通用 |
检测方法 | Colormetric |
灵敏度 | 检测下线除以10 |
样本体积 | 100μL |
样本类型 | 血清、血浆或其他相关生物液体 |
特异性 | 可检测样本中的指标,且与其它相关蛋白无明显交叉反应 |
重复性 | 板内,板间变异系数均<10% |
批内变异系数 | 批间变异系数 | |||||
样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
数量 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
平均值( MERGEFIELD 单位ng/mL) | 0.41 | 1.07 | 4.96 | 0.47 | 1.25 | 4.24 |
标准差 | 0.02 | 0.05 | 0.22 | 0.03 | 0.06 | 0.2 |
变异系数 (%) | 4.88 | 4.67 | 4.43 | 6.38 | 4.8 | 4.72 |
样本类型 | 回收率范围 (%) | 平均回收率 (%) |
血清(n=5) | 94-110 | 102 |
血浆(EDTA)(n=5) | 90-102 | 96 |
细胞上清(n=5) | 95-106 | 98 |
血清(n=5) | 血浆(EDTA)(n=5) | 细胞上清(n=5) | ||
1:2 | 回收率范围(%) | 99-108 | 95-105 | 92-104 |
平均回收率(%) | 105 | 102 | 97 | |
1:4 | 回收率范围(%) | 95-109 | 90-100 | 97-105 |
平均回收率(%) | 102 | 96 | 100 | |
1:8 | 回收率范围(%) | 89-103 | 89-104 | 96-108 |
平均回收率(%) | 97 | 97 | 102 | |
1:16 | 回收率范围(%) | 88-102 | 98-108 | 92-105 |
平均回收率(%) | 94 | 104 | 100 |
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
说明书 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1个 | 1个 |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 |
标准品 | 0.3ml×6管 | 0.3ml×6管 |
酶标试剂 | 5 ml×1瓶 | 10 ml×1瓶 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
终止液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 |
20×浓缩洗涤液 | 15ml×1瓶 | 25ml×1瓶 |
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 |
说明书 | 1份 | 1份 |
封板膜 | 2片 | 2片 |
密封袋 | 1个 | 1个 |
说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
操作步骤
1. 标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
4. 温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
7. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
试验所需自备物品
1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
3. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
4. 吸水纸
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。