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60mm细胞培养皿超低吸附,替代Nunc【174944】
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文献和实验,无阻碍。 酶消化法时要避免组织消化过度,需要每隔 20 min取出观察,无明显组织块后即结束消化;细胞团块越小,消化越快,1 mL 移液器可以吹打的组织块,约消化 30~60 min 即可完成;若组织难以剪切,也可以切成大小 1~2 mm3 左右大小,每 30 min 用 1 mL 的移液器吹打混匀一次,直至可以顺畅通过,约 1~2 小时可以充分消化。 研磨时为尽量减少细胞损伤,需要浸泡于培养基中研磨,避免干磨。
。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿(1*107-5*107 个细胞/皿)。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中,使其终浓度为0.75%,然后在室温缓慢旋转10分钟,使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中,并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS,将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g
了 B7 家族的第三个成员 B7-H1(即日后的 PD-L1)[2]。2000 年,Tasuku Honjo 教授等人证明了 PD-L1 能与 PD-1 结合,进而抑制 T 细胞的增殖与细胞因子的分泌,负调控淋巴细胞的激活,从此,B7-H1 被正式命名为 PD-L1(陈列平教授则继续使用「B7-H1」命名)[3]。2003年,陈列平教授第一次成功地使用 PD-L1 封闭抗体联合 T 细胞回输技术治愈了约 60% 的头颈癌小鼠[4]。2014 年 12 月,首个应用于肿瘤治疗的抗 PD-1 抗体
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