60mm细胞培养皿，TC处理

小鼠肿瘤样本单细胞悬液的制备及注意事项

，无阻碍。 酶消化法时要避免组织消化过度，需要每隔 20 min取出观察，无明显组织块后即结束消化；细胞团块越小，消化越快，1 mL 移液器可以吹打的组织块，约消化 30~60 min 即可完成；若组织难以剪切，也可以切成大小 1~2 mm3 左右大小，每 30 min 用 1 mL 的移液器吹打混匀一次，直至可以顺畅通过，约 1~2 小时可以充分消化。 研磨时为尽量减少细胞损伤，需要浸泡于培养基中研磨，避免干磨。

交联染色质免疫共沉淀（X-ChIP）实验设计

。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿（1*107-5*107 个细胞/皿）。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中，使其终浓度为0.75%，然后在室温缓慢旋转10分钟，使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中，并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS，将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g

3 分钟 get 大热的 PD-L1 免疫疗法

了 B7 家族的第三个成员 B7-H1（即日后的 PD-L1）[2]。2000 年，Tasuku Honjo 教授等人证明了 PD-L1 能与 PD-1 结合，进而抑制 T 细胞的增殖与细胞因子的分泌，负调控淋巴细胞的激活，从此，B7-H1 被正式命名为 PD-L1（陈列平教授则继续使用「B7-H1」命名）[3]。2003年，陈列平教授第一次成功地使用 PD-L1 封闭抗体联合 T 细胞回输技术治愈了约 60% 的头颈癌小鼠[4]。2014 年 12 月，首个应用于肿瘤治疗的抗 PD-1 抗体