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紫外分光光度法
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上海信帆生物科技有限公司
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50管/48样
离心是蛋白质、酶、核酸及细胞亚组分分离的最常用的方法之一,也是生化实验室中常用的分离、纯化的方法。尤其是超速冷冻离心已经成为研究生物大分子实验室中的常用技术方法。离心机(centrifuge)是实施离心技术的装置。离心机的种类很多,按照使用目的,可分为两类,即制备型离心机和分析型离心机。前者主要用于分离生物材料,每次分离样品的容量比较大,后者则主要用于研究纯品大分子物质,包括某些颗粒体如核蛋白体等物质的性质,每次分析的样品容量很小,根据待测物质在离心场中的行为(可用离心机中的光学系统连续地监测),能推断其纯度、形状和相对分子质量等性质。这两类离心机由于用途不同,故其主要结构也有差异。有色溶液对光线有选择性的吸收作用,不同物质由于其分子结构不同,对不同波长光线的吸收能力也不同。因此,每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液,虽对可见光无吸收作用,但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。分光光度技术(分光光度法) 主要是指利用物质特有的吸收光谱来鉴定物质性质及含量的技术,其理论依据是Lambert和Beer定律。分光光度法是比色法的发展,比色法只限于在可见光区,分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。比色法用的单色光通过滤光片产生,谱带宽度为40-120nm,精度不高,而分光光度法则要求近于真正单色光,其光谱带宽最大不超过3-5nm,在紫外光区可到1nm以下。单色光通过棱镜或光栅产生,具有较高的精度。基本原理分光分析法常被用来测定溶液中存在的光吸收物质的浓度,其理论依据是Lambert和Beer定律。1、Lambert定律:一束单色光在通过一溶液时,由于溶液吸收一部分光能,使光的强度减弱,若溶液的浓度不变,则溶液的厚度愈大,光线强度的减弱也愈显著。2、Beer定律:当一束单色光通过一溶液时,若溶液的厚度不变,则溶液浓度愈高,光线强度的减弱也愈显著。分光光度技术的基本应用1、测定溶液中物质的含量可见或紫外分光光度法都可用于测定溶液中物质的含量。测定标准溶液(浓度已知的溶液)和未知液(浓度待测定的溶液)的吸光度进行比较,由于所用吸收池的厚度是一样的,也可以先测出不同浓度的标准液的吸光度,绘制标准曲线,在选定的浓度范围内标准曲线应该是一条直线,然后测定出未知液的吸光度,即可从标准曲线上查到其相对应的浓度。含量测定时所用波长通常要选择被测物质的最大吸收波长,这样做有两个好处:⑴灵敏度大,物质在含量上的稍许变化将引起较大的吸光度差异;⑵可以避免其它物质的干扰。2、用紫外光谱鉴定化合物使用分光光度计可以绘制吸收光谱曲线,方法是用各种波长不同的单色光分别通过某一浓度的溶液,测定此溶液对每一种单色光的吸光度,然后以波长为横座标,以吸光度为纵座标绘制吸光度──波长曲线,此曲线即吸收光谱曲线。各种物质有它自己一定的吸收光谱曲线,因此用吸收光谱曲线图可以进行物质种类的鉴定。当一种未知物质的吸收光谱曲线和某一已知物质的吸收光谱曲线开关一样时,则很可能它们是同一物质。一定物质在不同浓度时,其吸收光谱曲线中,峰值的大小不同,但形状相似,即吸收高峰和低峰的波长是一定不变的。紫外线吸收是由不饱和的结构造成的,含有双键的化合物表现出吸收峰。紫外吸收光谱比较简单,同一种物质的紫外吸收光谱应完全一致,但具有相同吸收光谱的化合物其结构不一定相同。除了特殊情况外,单独依靠紫外吸收光谱决定一个未知物结构,必须与其它方法配合。紫外吸收光谱分析主要用于已知物质的定量分析和纯度分析。相关产品如下:硫氧还蛋白氧化还原酶(TrxR)检测服务谷胱甘肽还原酶(GR)检测服务还原型谷胱甘肽(GSH)检测服务氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量检测服务谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)检测服务硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)检测服务谷胱甘肽S-转移酶(GST)检测服务γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)检测服务γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性检测服务抗坏血酸(AsA)含量检测服务脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测服务L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)检测服务抗坏血酸氧化酶(AAO)活性检测服务抗坏血酸过氧化物酶(APX)检测服务脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测服务过氧化氢(H2O2)检测服务丙二醛(MDA)检测服务黄嘌呤氧化酶(XOD)检测服务葡萄糖氧化酶(GOD)检测服务多酚氧化酶(PPO)检测服务蛋白质羰基检测服务二胺氧化酶检测服务超氧阴离子检测服务超氧阴离子清除能力检测服务超氧化物歧化酶(SOD)检测服务过氧化氢酶(CAT)检测服务过氧化物酶(POD)检测服务铜蓝蛋白含量检测服务总抗氧化能力(T-AOC)检测服务羟自由基清除能力检测服务植物类黄酮检测服务植物总酚检测服务植物原花青素检测服务尿酸含量检测服务总巯基检测服务植物花色苷检测服务单宁含量检测服务果胶含量检测服务苯丙氨酸解氨酶(PAL)检测服务脯氨酸(PRO)含量检测服务ATP含量检测服务Na+k+ ——ATP酶检测服务Ca++Mg++ ——ATP酶检测服务硝酸还原酶(NR)检测服务谷氨酸合成酶(GOGAT)检测服务谷氨酰胺酶(GLS)检测服务谷氨酸脱氢酶(GDH)检测服务NO含量检测服务水土中亚硝酸盐含量检测服务食品中亚硝酸盐含量检测服务谷氨酰胺合成酶(GS)检测服务植物硝态氮检测服务土壤铵态氮检测服务土壤硝态氮检测服务植物氨态氮检测服务尿素氮检测服务谷丙转氨酶(GPT)检测服务谷草转氨酶(GOT)检测服务氨基酸(AA)含量检测服务半胱氨酸(Cys)含量检测服务谷氨酸(Glu)含量检测服务羟脯氨酸(HYP)检测服务乙酰胆碱酯酶(AchE)检测服务组织及血液酸性磷酸酶(ACP)检测服务组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)检测服务羧酸酯酶(CarE)检测服务
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