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- 中国
- impELHu1269-96T
- 2026年08月17日
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上海毕合生物化学技术有限公司
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- 适应物种：
科研人ELISA
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96T
ELISA 试剂中最常见的是双抗夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）是利用已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中待测物质的浓度呈比例关系。
小分子抗原或半抗原因仅有单个抗原表位，缺乏双抗体夹心法所需的基本条件——具有2个或2个以上表位，所以对其常用竞争法进行测定。其原理是将待检抗原和酶标抗原与相应固相抗体竞争结合，标本中抗原越多，与固相抗体结合的酶标抗原越少，与底物反应生成的颜色越浅，因此根据颜色深浅可定量测定。
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上海毕合生物化学技术有限公司
(Shanghai Bihe Biochemical Technology Co., Ltd ， 品牌： MBC)
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文献和实验酶联免疫技术是将抗原抗体反应的特异性与酶促反应的专一性和敏感性结合而形成的一种方法。这是一种固相酶免疫检测技术，始创于1971年。它既可用于测定抗原，又可用于测定抗体。其敏感性高，特异性强，已成为酶免疫技术中应用最广泛的一种方法。本实验以双抗夹心法检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）为例 【实验目的】 通过本实验的学习，了解酶联免疫吸附的基本原理及其用途，并熟悉其操作步骤与技能。 【实验原理】 酶联免疫吸附试验是以免疫学反应为基础，将酶（如辣根过氧化物酶，HRP）标记
上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 2. ELISA 的类型 ELISA 可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂：（1）固相的抗菌素原或抗体，即"免疫 吸附剂 "（immunosorbent）；（2）酶标记的抗原或抗体，称为"结合
采用。 保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外，一般均采用水浴，可将ELISA板置于水浴箱中，ELISA板底应贴着水面，使温度迅速平衡。为避免蒸发，板上应加盖，也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔，此时可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱，ELISA板应放在湿盒内，湿盒要选用传热性良好的材料如金属等，在盒底垫湿的纱布，最后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规定的温度，特别是在气温较低的时候更应如此。无论是水浴还是湿盒温育，反应板均不宜叠放，以保证各板的温度都能迅速平衡
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