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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Human IgG Fab Fragment Affinity Purified
- 规格:
5mg
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文献和实验利用胃 蛋白酶 分解IgG,将抗体断链为Fab和Fc片段。具体操作方法如下: 1.将IgG粉末100mg,溶于2ml0.10Mol/L pH4.0醋酸缓冲液。溶液稍成白浊,30℃,保温10min。 2.取结晶胃 蛋白酶 1.50mg,溶于1.50ml 0.10Mol/L pH4.0醋酸 缓冲液 ,加入上述溶液中,于30℃作用16h。 3.用0.10Mol
实验步骤 1. 抗Fab片段抗体亲和层析纯化法 1) 偶联抗人或抗鼠Fab片段抗体到Protein G Sepharose,将纯化的抗人或鼠Fab片段抗体以2mg/ml的比例与Protein G Sepharose凝胶珠溶液混合,室温旋转孵育1h。用10倍量的0.2mol/L硼酸钠(pH值9.0)洗两次,4 000r/min离心5min,用10倍量的0.2mol/L pH值9.0硼酸钠溶液,重悬凝胶珠子,加入足够量的DMP
免疫球蛋白提取 (Immunoglobulin isolation):Fab片段的制备方法
利用胃蛋白酶分解 IgG ,将抗体断链为 Fab 和 Fc 片段。具体操作方法如下: 1 .将 IgG 粉末 100mg ,溶于 2ml0.10Mol/L pH4.0 醋酸缓冲液。溶液稍成白浊, 30 ℃ ,保温 10min 。 2 .取结晶胃蛋白酶 1.50mg ,溶于 1.50ml 0.10Mol/L pH4.0 醋酸缓冲液,加入上述溶液中,于 30 ℃ 作用 16h 。 3 .用 0.10Mol/L pH
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