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Roche罗氏 04887352001 LightCycle

r 480 SYBR Green I Master(Roche)
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      北京云肽生物科技有限公司

    Roche罗氏 04887352001 LightCycler 480 SYBR Green I Master(Roche)
     

    罗氏Roche总部位于瑞士巴塞尔,是全球在医药和诊断领域,致力于研究并处于领先地位之一的保健集团。罗氏的诊断部门提供了du一无二的产品品种,为全世界的研究人员、医师、病人、医院和实验室提供多样化的创新测试产品及服务。罗氏诊断在全球有近19,000人员正致力于科研、发展、产品的市场运作和服务以及一体化的解决方案。



    产品名称:LightCycler 480 SYBR Green I Master(Roche)
    英文名称:LightCycler 480 SYBR Green I Master(Roche)
    产品货号:04887352001
    产品规格:10×5ml
    产品说明:
    概述
    LightCycler® 480 SYBR Green I Master 是一种用于 PCR 的单组分热启动反应混合物。它包含 FastStart Taq DNA 聚合酶和 DNA 双链特异性 SYBR Green I 染料,用于 PCR 产物检测和表征。由于该混合物作为易于使用的多合一主试剂提供,因此反应设置只需要添加模板DNA和引物。该混合物可与不同类型的 DNA(例如基因组 DNA 或 cDNA)一起使用,适用于 LightCycler® 480 仪器上 96 孔板或 384 孔板的高通量应用。
    应用
    LightCycler® 480 SYBR Green I Master专为研究而设计。当与 LightCycler® 480 系统一起使用时,该试剂盒非常适合热启动 PCR 应用。结合 LightCycler® 480 系统和合适的 PCR 引物,该试剂盒可以非常灵敏地检测和定量确定的 DNA 序列。该试剂盒还可用于执行两步 RT-PCR。它也可以与热不稳定的尿mi啶-DNA糖基化酶一起使用,以防止PCR过程中的残留污染。
    原则上,该试剂盒可用于扩增和检测任何DNA或cDNA靶标。
    原则
    LightCycler 480 SYBR Green I Master 是一种即用型反应混合物,专为在 LightCycler®® 480 仪器上应用 SYBR Green I 检测格式而设计。它用于在 96 或 384 多孔板中进行热启动 PCR。热启动PCR已被证明通过在反应开始时*大限度地减少非特异性扩增产物的形成,显着提gaoPCR的特异性和ling敏度

    FastStart Taq DNA 聚合酶是一种化学修饰形式的热稳定重组 Taq DNA 聚合酶,在高达 75°C 的温度下没有活性。 该酶仅在高温下具有活性,其中引物不再非特异性结合。在循环开始之前,酶在单个预孵育步骤(95°C,5 - 10分钟)中完全激活(通过去除封闭基团)。激活不需要其他热启动技术典型的额外处理步骤。
    PCR产物的产生可以通过测量SYBR绿I荧光信号来检测。SYBR Green I插入DNA螺旋(5)。在溶液中,未结合的染料表现出很少的荧光;然而,荧光(波长,530 nm)在DNA结合时大大增强。因此,在PCR过程中,SYBR Green I荧光的增加与产生的双链DNA量成正比。由于SYBR Green I染料非常稳定(在30个扩增循环中只有6%的活性损失),并且LightCycler® 480仪器的光学滤光片组与激发和发射波长相匹配,因此它是测量总DNA的shou选试剂。

    在光循环仪® 480系统上进行实时荧光定量PCR期间,使用SYBR Green I进行DNA检测的基本步骤是:

    1. 在扩增开始时,反应混合物包含变性DNA、引物和染料。未结合的染料分子发出微弱的荧光,产生最*小的背景荧光信号,在计算机分析过程中会减去该信号。
    2. 引物退火后,一些染料分子可以与双链结合。DNA结合导致SYBR Green I分子在激发时发光的急剧增加。
    3. 在伸长过程中,越来越多的染料分子与新合成的DNA结合。如果连续监测反应,则可以实时观察荧光的增加。在下一个加热循环的DNA变性后,染料分子被释放并且荧光信号下降。
    4. 在每个PCR循环的伸长步骤结束时进行荧光测量,以监测扩增DNA量的增加。

    为了证明只有您想要的PCR产物被扩增,您可以在PCR后进行熔解曲线分析。在熔解曲线分析中,反应混合物缓慢加热至97°C,这导致双链DNA熔解并相应降低SYBR Green I荧光。仪器持续监测这种荧光降低,并将其显示为熔解峰。每个熔解峰代表特定DNA产物的特征解链温度(Tm)(其中DNA为50%双链和50%单链)。决定dsDNA的Tm的*重要因素是该片段的长度和GC含量。如果PCR仅产生一个扩增子,则熔解曲线分析将仅显示一个熔解峰。如果存在引物二聚体或其他非特异性产物,它们将显示为额外的熔点峰。因此,检查PCR产物的Tm可以与在凝胶电泳中按长度分析PCR产物进行比较。
    其他说明
    仅用于生命科学研究。不适用于诊断程序。
     
    以下是Roche品牌的部分产品目录,如需其它产品请咨询客服
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    04476115001 X-tremeGENE? siRNA Transfection Reagent(Roche)  5×1 mL
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    04707516001 LightCycler 480 SYBR Green I Master(Roche)5*1ml
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    6402712001 FastStart Essential DNA Green Master(Roche)5×100反应(20μl)
    04693124001 cOmplete, Mini Protease Inhibitor Cocktail 30tablets
    04693159001 cOmplete, Mini, EDTA-free Protease Inhibitor Cocktail      30tablets
    10127698001 β-Glucuronidase/Arylsulfatase(Roche)10ml
    11088815001 Collagenase B 胶原酶B(Roche) 500mg



     

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