Oligo(dT)18磁珠（1um）

 Oligo(dT)18磁珠，具有合适的 Oligo(dT)18 载量，尺寸约为 1 μm，分散性好，具有较高的磁含量，磁响应速度快。通过磁珠表面的 Oligo dT 与 mRNA 尾部 Ploy A 之间互补配对，Oligo(dT)18可以高效地从真核生物总RNA或直接从动植物组织、细胞中快速分离出完整、高纯度的mRNA。提取的 mRNA 可用于分子生物学的各种下游实验中，如 RT-PCR、cDNA 文库构建、Northern Blot 分析、引物延伸、基因表达分析等。

产品特征：
1、Oligo(dT)18的实验方案可在 30 分钟内完成，无需其他纯化步骤。
2、磁珠修饰的 Oligo(dT)18 可在捕获 mRNA 后作为反转录成 cDNA 第一链的引物。
3、 高的 poly A 特异性结合能力确保最大限度地提取 mRNA。
4、 1 mL 的 MagBeadsTM Oligo(dT)18 磁珠可以结合 10~20 μg 来自细胞或组织的 mRNA（取决于表达水平）。
5、来自细胞的 rRNA 是远远过量的，即使非特异性捕获效率低，仍会有一定的 rRNA 结合，在Oligo(dT)18上的 rRNA 通常会比 Oligo(dT)25 上的少。

使用缓冲溶液和材料：（所有试剂需要使用 DEPC 处理的水配制）
1、建议缓冲液组：20×柠檬酸钠缓冲液（SSC）：3M 氯化钠，0.3M 柠檬酸钠，pH 7.0；mRNA 杂交缓冲液：0.5×柠檬酸钠缓冲液（SSC）；mRNA 洗涤缓冲液：0.2×柠檬酸钠缓冲液（SSC）；
2、无 RNase 的 1.5 mL 离心管；
3、用于 1.5 mL 离心管的磁力架；
4、焦碳酸二乙酯（DEPC）处理的灭菌水：纯水在 37℃下用 0.1% DEPC 处理至少 1 小时，然后加热至
100℃ 15 分钟或高压灭菌 15 分钟以除去任何痕量的 DEPC；
5、水浴锅。

清洗  Oligo(dT)18磁珠：
1、重悬试剂瓶中的 MagBeads™ Oligo(dT)18磁珠（即涡旋>30 秒，或手动摇晃至充分混匀）。
2、将所需体积（每 100 μg 总 RNA 对应 0.5 mg 磁珠）的 MagBeads™Oligo(dT)18 磁珠转移到离心管中，加入相同体积的杂交缓冲液，并重新悬浮。
注意：杂交缓冲液在低温保存条件下可能会沉淀。如果溶液产生沉淀，使用前应将溶液在室温放置一段时间，必要时可在 37℃水浴中预热 10 分钟溶解沉淀，摇匀后使用。
3、将离心管置于磁力架上 1 分钟，弃去上清液。
注意：吸弃废液时，尽量吸净管盖及管底残液，请勿吸入磁珠。
4、从磁力架上取下离心管，并将洗过的 MagBeads™Oligo(dT)18 磁珠重悬在与初始体积相同体积的杂交缓冲液中，留作下一步备用。

从 100 μg 总 RNA 中纯化 mRNA：
1、用 DEPC 处理过的灭菌水或 10 mM Tris-HCl（pH7.5）将总 RNA 样品的体积调整至 100 μL。
注意：如果总 RNA 浓度比 1 μg/μL 更稀，100 μg RNA 可以添加到更多体积。在这种情况下，步骤 3 中使用的杂交缓冲液的体积增加至等于总 RNA 样品的体积。
2、65℃加热总 RNA 溶液 10 分钟，然后将样品转移至冰上。
3、将 100 μL 总 RNA 溶液和 5 μL 20×SSC 缓冲液加入重悬的磁珠中，通过反复吸取混合。
4、在室温下孵育混合物，温和振荡 10 分钟以使 mRNA 与磁珠杂交。
5、使用磁力架收集与 mRNA 杂交的磁珠。
注意：若离心管管口及管壁上粘有少量磁珠，请将磁珠重悬至离心管，可参考如下步骤：将离心管置于磁力架上，待磁珠完全吸附于管壁后，上下颠倒磁力架，使粘在管口的磁珠重悬至溶液中，避免磁珠损失。
6、用移液枪移除上清。
注意：如果需要，可以保留包含总 RNA 未结合部分的上清液，以便于之后完全提取 mRNA。
7、使用 100 μL 洗涤缓冲液洗涤结合 mRNA 的磁珠，轻柔混匀 1-2 分钟，使用磁力架进行磁分离弃上清。
8. 重复步骤 7 两次。
注意：完成最后一次清洗时务必清除所有洗涤缓冲液。
9、从磁力架上取下离心管，加入 20-50 μL DEPC 处理的灭菌水或 10 mM Tris-HCl（pH7.5），重悬磁珠。
10、65℃加热 2 分钟。
11、迅速使用磁力架收集上清，并将上清液转移至无 RNase 的离心管中。RNA 可以在-20℃保存一个月，在-80℃长期保存。 

粒径：约1 μm
磁含量：约35 %-45%
保存溶液：0.02 M PBS，含 0.1%BSA作为防腐剂
Oligo(dT)18载量：400 pmol / mg 磁珠