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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
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- 细胞类型:
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- 品系:
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- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
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- 免疫类型:
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- 细胞形态:
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- 是否是肿瘤细胞:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
2 ~ 8 ℃,避光,有效期12个月。
- 年限:
2 ~ 8 ℃,避光,有效期12个月。
- 生长状态:
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- 英文名:
-
- 规格:
500ml
| 产品描述 | |
| 描述 | 神经元基础培养基用于出产前/胚胎神经元细胞的培养,使用时需添加 B-27(abs9120)或 N-2(abs9121) 添加剂。可应用于海马神经元,大脑皮层和大脑其他区域的神经细胞的培养。该培养基可以在不添加胶质细胞饲养层的情况下,短长期或长期的维持神经细胞的同源群落存活。 神经元基础培养基不含 L-谷氨酰胺 (Glutamine)、L-谷氨酸和 L-天冬氨酸,必须组合无血清添加剂 (例如 B-27 或 N-2 添加剂),或者血清和 0.5 mM L-谷氨酰胺,再或者血清和 0.5 mM L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液。初次接种平板时,应加 入 25 µM L-谷氨酸。 |
| 外观 | 红色澄清液体 |
| 技术指标 | 内毒素:≤1 EU/mL 渗透压:270 ~ 340 mOsm/kg·H20 pH 值:7.0 ~ 7.4 |
| 产品用途 | 本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。 |
| 使用方法 | 准备培养基: 1、每 100 ml 神经元基础培养基添加 2 ml B27 添加剂(50 X),并加入终浓度 0.5 mM 的 L-谷氨酰胺 (Glutamine)或 L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液;或者每 100 ml 神经元基础培养基添加 1 ml N-2 添加剂(100 X),并加入终浓度 0.5 ~ 2 mM 的 L-谷氨酰胺或 L-丙胺酰-谷氨酰胺溶液; 2、原代神经元细胞首次接种平板时,应先加入 25 µM(3.7 μg/ml)L-谷氨酸。有些细胞系需要加入终浓度 2% 的血清促进细胞贴壁; 3、可加入 25 µM β-巯基乙醇以延长海马神经元的存活时间; 注意:培养基准备完全后,请避光保存在 2 ~ 8 ℃ 的环境里,并于一周内使用完毕。 细胞培养的条件: 培养基:神经元基础培养基 细胞类型:贴壁细胞 培养容器和设备:培养板,培养瓶和 CO2 恒温培养箱 培养温度:36 ~ 38 ℃ 培养条件:CO2 含量 5 % 的湿润空气,避光。 实验前应对细胞培养仪器进行温度和空气的设置。 以下实验方案,均以 6 孔培养板为例。 神经细胞培养: 原代神经元细胞的培养在神经生物学和药理学中都是必不可少的。科学家钟爱使用新分离的神经元细胞,因为它们保留着良好的功能性,但是考虑到获取不便,使用商品化的大鼠原代神经元细胞更具有灵活性,能够立即使用,同时其功能性等同于新分离的神经元细胞。而特定原代神经元细胞类型的获取,非常依赖操作者优化的实验方案。 培养板培养细胞: 1、在 48 孔培养板或者其它培养器皿上包被冷的多聚 D-赖 氨酸溶液(0.05 mg/ml)。用于原代神经元细胞培养时,包被量 0.15 ml/cm2,室温下 1 小时; 2、移去包被液,并用无菌水冲洗两次(包被液有细胞毒性,请冲洗彻底); 3、勿覆盖冲洗后的培养板,保证空中水分完全干燥。干燥后可立刻使用,或者可在 4 ℃ 的干燥环境中保存两周; 4、接种细胞入培养板,每 60 ~ 150 μL神经元基础培养基和添加剂的混和培养基,接入 90 ~ 320 个/mm2 的细胞; 5、放入培养箱培养一小时; 6、倾斜培养板,将培养基轻轻吸出; 7、在孔中迅速加入 0.4 ml/孔 预热的神经元基础培养基和添加剂的混和培养基; 8、接种细胞后 3 ~ 4 天,首次更换培养基,以后每隔 3 天更换一次培养基;更换时,吸出一半旧培养基,加入等量新培养基。 注意:培养成神经细胞瘤时,接种和替换的培养基中需要含 L-谷氨酰胺溶液。 复苏: 低温储藏复苏后的原代神经元细胞非常脆弱,请勿离心收集细胞!神经元细胞可以附着在塑料或者玻璃表面。为了复苏细胞,我们推荐在使用之前,请用培养基预冲洗所有塑料和玻璃表面。 1、实验前请准备好多聚 D-赖氨酸溶液包被的无菌培养器皿; 2、在 37 ℃ 水浴中,迅速(< 1 分钟)溶解一小管冻存的细胞。最后一丝冰融化时,立刻从水浴中移出管子; 3、在完全培养基中冲洗移液器尖端,然后轻轻的吸取小管中溶解的细胞,并转移至预先用培养基冲洗过的 15 ml 圆锥管中; 4、用 1 ml 预热的培养基冲洗小管,然后用每秒钟 2 滴的速度滴到 15 ml 圆锥管中,每滴后轻摇混匀; 5、逐滴加入 2 ml 培养基,每滴后轻摇混匀,使管内悬液体积达到 4 ml; 6、细胞计数; 7、在多聚 D-赖氨酸溶液包被过的 48 孔板(或者 8 腔室盖玻片)的每个孔(或者腔室)中加入约 1 × 105 个细胞,并用培养基补充终体积至 500 μL; 8、放入培养箱培养; 9、接种细胞后每隔 3 天更换一次培养基;更换时,吸出一半旧培养基,加入等量无 L-谷氨酰胺的新培养基。 |
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文献和实验细胞培养基本条件1、合适的细胞培养基合适的细胞培养基是体外细胞生长增殖的最重要的条件之一,培养基不仅提供细胞营养和促使细胞生长增殖的基础物质,而且还提供培养细胞生长和繁殖的生存环境。2、优质血清目前,大多数合成培养基都需要添加血清。血清是细胞培养液中最重要的成分之一,含有细胞生长所需的多种生长因子及其它营养成分。3、无菌无毒细胞培养环境无菌无毒的操作环境和培养环境是保证细胞在体外培养成功的首要条件。在体外培养的细胞由于缺乏对微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物质污染,或者自身代谢
基础篇-无菌操作基本技术 1. 实验进行前,无菌室及无菌操作台(laminar flow) 以紫外灯照射30-60 分钟灭菌,以70% ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,且即使培养基相同亦不共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70% ethanol 擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后,再进行下一个细胞株之操作。 2. 无菌操作工作区域应保持
, 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基? 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基, 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基, 细胞大都无法立即适应, 造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类? 不能。血清是细胞培养上一个极为









