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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃保存,有效期12个月。
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Permeabilization Wash Buffer
- 库存:
现货
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- CAS号:
-
- 规格:
150ml
| 描述 | 破膜剂通常用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理,破膜剂使流动的,完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞,使用流式细胞仪检测细胞内抗原时,先对待测细胞进行固定,破膜处理后,再加入抗体或检测试剂,孵育一定时间后即可上机分析。 |
| 外观 | 溶液 |
| 应用 | 流式分析 |
| 使用方法 | 1、收获待测细胞,1000rpm离心10min,弃上清; 注意:做流式细胞实验,一般的细胞量就是控制在5*106-107个cell/ml; 请第一步收集细胞,细胞调整到这个密度。 做流式每管的细胞量可取100ul,离心后,收集细胞,按照说明书进行固定和破膜处理。 2、加入500ul 4℃预冷的固定剂; 3、室温避光孵育10 min; 4、1000rpm离心10 min; 5、弃上清,加入PBS洗一次,1000rpm离心10 min 6、弃上清,加入1.5 ml破膜剂; 7、室温孵育10-15 min; 8、1000rpm离心5min; 9、弃上清,加入适量破膜剂重悬细胞; 10、加入检测抗体染色后,用流式细胞仪进行分析; |
| 注意事项 | 1、本产品含有毒物质,请注意防护,避免与皮肤,眼睛和粘膜的接触; 2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
| 储存/保存方法 | 4℃保存,有效期12个月。 |
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文献和实验- Macrophage SCAP Contributes to Metaflammation and Lean NAFLD by Activating STING–NF-κB Signaling PathwayXinyu Huang, Yingcheng Yao, Xiaoli Hou, Li Wei, Yuhan Rao, Yu Su, Guo Zheng, Xiong Z.Ruan, Danyang Li, Yaxi Chen
Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology. 2022 May 06 ; 1
影响因子: 9.225
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吉林大学. 2021 Jun 01 .
T一般指的是Tween,至少做ELISA用的是指Tween-20,但是你的目标抗原在胞浆内,肯定要破膜释放抗原,才能和抗体结合,所以和楼上的朋友一样,我也觉得是Triton(破膜剂),我裂解细胞一般用1%的TritonX-100.洗液用PBS和TBS都可以吧,两个都是缓冲液,我们做WB时一般用TBS,但是我同学嫌TBS配起来麻烦,就用PBS代替,做的也很好。养细胞一般用PBS。具体用PBS or TBS可参考相关文献或者试剂说明书。dongwp认为:PBST中的T一般指的是Tween。要破膜释放
光的病毒摸一下合适的病毒量。先做一下预实验,(别人都讲 MOI 值,即感染时病毒与细胞数量的比值),元元不讲。1. 慢病毒转染前 18~24 小时,将贴壁细胞 以 1×10^5(根据细胞大小而定,一般转染前细胞长到 40-60% 为宜)孔铺到 24 孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为 2×10^5 / 孔左右。2. 加入 polybrene6-8 ug/ml(这个相当是破膜剂,只有细胞膜破了,病毒才有机会进入细胞内发挥作用),设置合适的病毒浓度梯度,比如 24 孔板,设置 5 个梯度,分别加入病毒
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)能够快速测定细胞悬液中单个细胞的生物学性质,并可以对特定的细胞进行分选收集。广泛用于细胞生物学,免疫学,遗传学,基础医学等领域。接下来的 Protocol 中以小鼠的淋巴细胞为例进行细胞表面和胞内染色。一. 试剂准备Wash Buffer:PBS+1% FBS破膜剂(ICS):用双蒸水配置 10 % Saponin(Sigma)。破膜固定剂:将配好的 ICS 用 4% 多聚甲醛稀释 100 倍ICS Wash Buffer:将配好的 ICS
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