150 nm磁转染试剂

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产品描述：

产品名称：150 nm磁转染试剂

中文别名: 150 nm magnetic transfection kit

描述: 150 nm磁转染试剂（PEI@Fe3O4），具有高负载量以及高的表面正电荷，因而具有高的转染效率，安全环保无污染，胶体稳定性好，同时具有优良的磁共振成像能力。产品为褐色澄清水胶体，已采用0.22微米滤膜过滤除菌、操作简单、在磁标板（24或96孔）作用下易被细胞吞噬、可用于DNA或RNA的高效转染实验研究。

浓度: 1mg/mL

使用方法:

转染方法：
不同细胞系的最佳实验条件有所不同，因此需要调整 DNA 或 RNA 的使用量及不同成分间的比例，获得最佳的实验效果。以下举例的实验方法在多个细胞系中使用成功，可作为最短的孵育时间获得好的转染效果的方法指导。

磁转染试剂-贴壁细胞转染方法：

1、接种贴壁细胞，在铺满 60-80%时进行磁性转染。如有必要可以在更换不含血清的新鲜培养基后（血清可能影响转染复合物的形成），立即进行转染。
2、将需要量的磁性纳米颗粒置于微量离心管中，按1:1的量加入用无血清细胞培养液稀释好的DNA。DNA 的推荐使用量为 50-300 ng/cm² 培养皿，如上表：（96 孔板：0.1-0.5 µg/孔，24 孔板：0.5-2 µg/ 孔 6 孔板：2-6 µg/孔）
3、37℃孵育 15-30 min。
4、将孵育好的 DNA/磁性纳米颗粒复合物加至细胞中，将培养板放置于磁标板上，37℃孵育 10-20 min。
5、由于加入无血清和无添加剂的转染复合物后导致如血清、抗生素或其他添加剂被稀释，或转染体系中，细胞培养液不含血清时，需更换细胞培养液（选做）。
6、置于 37℃，5%CO₂,培养箱中培养。
7、转染后 48 小时之后可以形成稳定转导的细胞，将细胞转移到含有适当抗生素的新鲜培养基中进行筛选。

磁转染试剂– 悬浮细胞转染方法：
1、将需要转染的细胞用培养基（有或无血清或添加剂稀释，根据细胞类型及对血清敏感程度决定）稀释至 5×10⁵–1×10⁶/mL。
2、将需要量的磁性纳米颗粒置于微量离心管中，按1:1的量加入用无血清细胞培养液稀释好的DNA。3、 37℃孵育 15-30 min。
4、按以下推荐的 3 种方法之一，将细胞沉到培养皿底部，以增加细胞与磁性纳米颗粒的接触。
（1）在聚赖氨酸包被的板上接种细胞，后续按照贴壁细胞的实验方法操作
（2）短暂离心细胞（2 分钟）使其形成细胞团，后续按照贴壁细胞的实验方法操作
（3）将细胞悬浮液与磁转染试剂混合，每 mL 细胞加 30 µL 磁转染试剂孵育 10-15 分钟，按表中建议的转染体积，将细胞加到培养板中，置于磁标板上孵育 15 min，将孵育好的 DNA/磁性纳米颗粒复合物加至细胞中，将培养板放置于磁标板上，37℃孵育 10-20 min。小心将细胞培养上清吸出（此过程不要移动磁标板，且要避免吸到细胞），更换新鲜培养液，将培养板从磁标板上移开，置于 37℃，5%CO₂，培养箱中培养。

储存/保存方法: 4℃密封保存，有效期12个月。

技术指标:

（1）透射电子显微镜尺寸与形貌：为 10 nm 左右的磁性纳米颗粒聚集体，主要分布在 100-200 nm 之间 
（2）水动力尺寸： 约 130 nm
（3）表面 Zeta 电位：大于+50 mV
（4）磁性：具有超顺磁性，饱和磁化强度约 60 emu/g Fe

注意事项: 使用和保存过程中应避免冻融，取用后及时盖紧瓶盖。

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