公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)! 产品描述: 产品名称:Caspase 1 活性检测试剂盒 描述: Caspase 1活性检测试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 1酶活性或纯化的caspase 1酶活性的试剂盒。Caspase是参与细胞凋亡过程的蛋白酶家族,包含10多个成员。其中Caspase-1是唯一可剪切IL-1b和IL-18前体产生活性细胞因子的caspase。Caspase-11剪切45kD的caspase-1前体蛋白产生20kD和10kD片断,这两个片断可以形成异源二聚体,并进一步形成四聚体。此四聚体具有蛋白酶活性。Caspase-1通过剪切Bcl-XL调节细胞凋亡,并通过对细胞因子前体的剪切来调控相关细胞因子介导的免疫炎性反应。 本试剂盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA产生黄色的pNA (p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 1的活性。pNA在405nm附近有强吸收。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品(20T)或者100个样品(100T)。 产品组分:
产品组成 |
20T |
100T |
裂解液(Lysis buffer) |
8ml |
30ml |
检测缓冲液(Assay buffer) |
8ml |
20ml |
Ac-YVAD-pNA(2mM) |
200ul |
1ml |
pNA(10mM) |
200ul |
1ml |
中文别名: interkeukin 1β conberting enzyme,ICE,caspase-1,caspase 1 使用方法: 测定pNA标准曲线: 1、用反应缓冲液稀释10mM pNA标准品为200, 100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.125μM。设置不加pNA的零管。 2、每一浓度取100 μl加入96孔板或100μl比色杯,测定405nm吸光度OD值。 3、每一浓度标准管OD405值为x轴,对应的pNA浓度为y轴,用Excel制作pNA浓度对OD405值的标准曲线。 Caspase 1 酶活性的检测: 1、取出适量的Ac-YVAD-pNA (2mM),置于冰浴上备用。 2、按照100ul反应体系: 空白对照组:检测缓冲液40μl、待测样品0μl、裂解液50μl、Ac-YVAD-pNA (2mM)10μl; 样品组:检测缓冲液40μl、待测样品50μl、裂解液0μl、Ac-YVAD-pNA (2mM)10μl 3、加入Ac-YVAD-pNA (2mM)后混匀,注意避免在混匀时产生气泡。37ºC孵育60-120分钟。发现颜色变化比较明显时即可测定A405。如果颜色变化不明显,可以适当延长孵育时间,甚至可以孵育过夜。 4、样品的A405扣除空白对照的A405,即为样品中caspase 1催化产生的pNA产生的吸光度。通过同步骤1中获得的标准曲线对比就可以计算出样品中催化产生了多少量的pNA。 储存/保存方法: -20℃保存,Ac-YVAD-pNA和pNA需要避光保存。 产品信息订购:
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