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- 爱必信(absin)
- 上海
- abs968
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃保存，有效期12个月。
- 保质期：
4℃保存，有效期12个月。
- 英文名：
Western一抗二抗去除液（弱碱性）
- 库存：
现货
- 供应商：
爱必信(上海)生物科技有限公司
- CAS号：
-
- 规格：
500ml
| 公告提醒：爱必信所有产品和服务仅用于科学研究，不用于临床应用及其他用途提供产品和服务（也不为任何个人提供产品和服务）!
产品描述： 产品名称：Western一抗二抗去除液(弱碱性) 描述: Western一抗二抗去除液又称膜再生液或Western抗体洗脱液(Stripping buffer)，用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping buffer可以洗脱一抗二抗，非常方便地重新利用使用过的膜，检测其它蛋白。 Stripping buffer多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜，一般可以利用2～3次。 通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个 SDS-PAGE 胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。 Western一抗二抗去除液（弱碱性）主要依靠碱性来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失， 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用，尤其适用于PVDF膜，其次为硝酸纤维素膜。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB，NBT/BCIP)不适用于本试剂。
注意事项：
1、使用辣根过氧化物酶标记的抗体时，封闭液必须使用5%脱脂奶粉配制。使用碱性磷酸酯酶标记的抗体时，封闭液必须使用酪蛋白(casein)配制。
2、Western一抗二抗去除液(弱碱性)特别适用于PVDF膜的再生，硝酸纤维素膜的再生效果不如PVDF膜。
3、Western一抗二抗去除液(弱碱性)适用于ECL等类似的化学发光液的检测后的一抗二抗洗脱。非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB，NBT/BCIP)不适用于本试剂。
4、Western一抗二抗去除液(弱碱性)有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法: 1、在膜完成Western化学发光检测后，蒸馏水中漂洗5min。 2、弃蒸馏水，加入Western一抗二抗去除液（弱碱性），完全覆盖住膜。 3、摇床上漂洗20-30min。 4、弃液，尽量把Western一抗二抗去除液（弱碱性）去除干净，必要情况下，可以用滤纸吸干。 5、加入蒸馏水振荡漂洗2～3次，每次漂洗3～5min。 6、入封闭液进行封闭后(推荐酪氨酸或脱脂奶粉作为封闭液)，进行Western后续操作。 PH值: pH=10.0 储存/保存方法: 4℃保存，有效期12个月。 absin，您身边的科研百宝箱 |
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文献和实验- 基于KEAP1/IKKβ/NF-κB信号通路研究枸杞多糖对四氯 化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用
伍智慧
宁夏医科大学. 2021 Mar 01 .
【求助】western检测肿瘤细胞的 nf-kb p65表达时用的转膜条件是什么
yangcroom 请问大家，用western检测肿瘤细胞的 nf-kb p65表达时用的转膜条件是什么？多少V多少分钟？一抗二抗孵多久？我用的是中杉分装的nf-kb p65的抗体。还要注意些什么？ yangcroom 顶一下！ shichong 100v2h,一抗4°过夜，二抗1h yangcroom 谢谢 shichong ，我准备提总蛋白做的NF
llh刘丽华 请教高手我最近做western blot，结果总是不理想，目的条带总是很淡，上样量已经是60ug了，封闭用的是5%脱脂奶粉，我还应该怎么改进哦？下面是我的结果，采用的是ECL化学发光，凝胶成像系统拍照，下面一条是我的目的条带。 麻烦各位帮帮忙吧！ Mostino 转膜应充分，并提高第一抗体的使用量！ 成其瑞 用好点的抗体 volano
，还借用师兄师姐的二抗多次，一样是空白结果，所以排除一抗二抗的问题。3.配胶浓度问题：换了好几种分离胶浓度，仍无条带。4.孵育时间问题：一开始一抗过夜，二抗 2 小时孵育，最后改为一抗过夜，后再平遥一小时，二抗过夜，结果仍无条带。5.样本问题：将样本送到师兄和厂家那里能做出结果，师兄的样本借我后，仍做不出结果，排除样本问题。6.TBST 洗膜液浓度问题：借用师兄的洗膜液配置牛奶和洗膜，仍无条带。7.运气问题：为了驱赶不好的运气，菜鸟师姐和淑女师妹回家呆了半个多月，求神祈福，查找各种 Western
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