手机验证
询价列表
暂时没有已询价产品
微信扫一扫分享
分享到新浪微博
分享到丁香园论坛
中大量高纯质粒富集提取试剂盒
企业认证
室温(10-30℃)保存,溶液B请于2-8℃存放;有效期1年
1年
-
现货
爱必信(上海)生物科技有限公司
60T/40T
公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)!
产品描述:
产品名称:中大量高纯质粒富集提取试剂盒
描述: 该产品是专门用于中大量菌液(5、10、20、50、100mL或以上)质粒DNA提取纯化的试剂盒。它采用独特的溶液配方,能高效地去除蛋白质、RNA、多糖和内毒素等杂质,同时还配置了经反复实验优选的高效富集吸附柱,配套真空浓缩装置,对提取的质粒进行更进一步的纯化。它可大幅提升洗脱液中质粒DNA的浓度,DNA浓度可达2ug/uL以上,并且可根据实验需要进行调节。试剂盒提取得到的质粒DNA纯度高,可高效去除质粒中的内毒素污染,提取得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、酶切、PCR、测序、体外转录与翻译、构建文库等多种分子生物学实验。 产品特点: 1、高效提取中大量菌液质粒DNA,提取菌液量:5mL、10mL、20mL、50mL、100mL或以上; 2、提取质粒DNA纯度高,可高效去除质粒中污染的内毒素,有效提升质粒转染实验的成功率; 3、真空浓缩,大幅提升洗脱液中质粒DNA浓度,DNA浓度可调节,可高达2ug/uL以上; 4、用于培养菌液样本中质粒DNA的提取,提取后的质粒DNA可用于细胞转染、酶切、PCR、测序、体外转录与翻译、构建文库等多种分子生物学实验。
使用方法: (请根据需要自备异丙醇、乙醇、50mL离心管、20mL离心管或15mL离心管) 1. 取出洗涤液,按终浓度70%比例加入无水乙醇,如每3mL洗涤液加入7mL无水乙醇,每6mL洗涤液加入14mL无水乙醇,充分混匀。 2. 取30mL菌液,置于50mL离心管中,4000rpm 离心5 min,彻底弃除上清。 3. 加入5ml溶液A,充分振荡2分钟,使菌体充分悬浮,确保无絮块存在,转移到15mL离心管。4000rpm离心5min,彻底弃除上清。 4. 加入1ml溶液I和50ul溶液B,充分振荡2分钟,使菌体充分悬浮,确保无絮块存在。 5. 加入2ml溶液II,盖紧管盖,轻轻颠倒混匀6次,注意整个管子的内表面均需与溶液II接触,室温放置至溶液清亮。(一般为4-5min,如5min后溶液未变清亮,说明细菌过多,应考虑减少菌液量。注意混匀手法要温和,不要剧烈混合。溶液II取液后应尽快旋紧管盖。) 6. 加入1.5ml溶液III,盖紧管盖,立即轻轻颠倒混匀8次,4℃放置5min。(此步注意要尽快混匀,但手法要温和) 7. 4℃、10000rpm离心15min,小心吸出上清,轻移至新的15ml离心管。(应在离心机自动停转后取出离心管,以免沉淀悬浮) 8. 加入2.5ml异丙醇,充分混匀。将富集吸附柱放在抽滤装置上,再将10mL无菌注射器针筒插入富集吸附柱上端,将上述溶液转入针筒内,真空抽滤至富集吸附柱内液体刚刚抽滤完毕(约2-10分钟,注意不要抽滤太干,太干不利于后续步骤开展)。 9. 向针筒内加2mL 洗涤液,静置2分钟,真空抽滤至富集吸附柱内液体刚刚抽滤完毕(约1-5分钟,注意不要抽滤太干)。 10. 向针筒内加1mL 洗涤液,抽滤2 分钟。同时,按每份样本20μL 取洗脱液(如10份提取样本,即取200μL 洗脱液),放置于灭菌1.5mL离心管,65℃预热。 11. 将富集吸附柱放入收集管内,12,000 rpm 离心3 分钟,离去残留的洗涤液。 12. 取出富集吸附柱,放入新的1.5mL灭菌离心管内,加入20 μL 预热洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm离心2 分钟,收集DNA溶液。
储存/保存方法: 室温(10-30℃)保存,溶液B请于2-8℃存放;有效期1年
注意事项: 1、 单只富集吸附柱质粒负载量在60ug左右,提取的菌液量应根据所含质粒量进行选择,如预估1mL菌液可提质粒2ug,则单个提取套装提取菌液不要超过30mL,如菌液较多,可分2管或多管进行。 2、 溶液II取液后应尽快旋紧管盖,密封避光保存。溶液II、溶液III如出现结晶或者沉淀,可在37℃水浴中加热几分钟溶解。 3、 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。 如所提质粒为低拷贝质粒或者大于10kb的大质粒,应加大菌体使用量,按比例增加溶液I、溶液B、溶液II、溶液III、异丙醇等的用量。 4、 所用洗脱液的最小体积为10 μL,可根据所提质粒的预估量和期望达到的质粒浓度选择合适的洗脱液用量,如预估提取的质粒量为40ug,期望的质粒浓度为2ug/uL,则选择20μL洗脱液进行洗脱。 本产品经严格的质量检验证明,无生物污染
产品信息订购:
产品更多信息请进入爱必信(absin)商城查看》》》
absin,您身边的科研百宝箱 专业提供试剂、耗材、仪器,在线订购,7*24h全国发货,方便快捷!
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
需要更多技术资料 索取更多技术资料
60 人阅读发布时间:2023-09-06 11:25
马上登录 或注册,即可保存询价历史