公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)! 产品描述: 产品名称:PM原代细胞质粒DNA转染试剂盒 描述: 这款产品是在Plasmid DNA Transfection Reagent的基础上进一步优化研发成功的专门用于原代细胞质粒DNA转染的转染试剂。它具有非常卓越的转染性能,可高效转染多种原代细胞,转染效率高达70%以上(EGFP质粒)。它不仅可转染较大分子的质粒DNA,还可转染RNA和小分子DNA。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同,这款产品采用生物可降解材料配制,对细胞的毒性很低,转染后细胞死亡率不到10%。使用也非常方便,先将转染试剂与质粒DNA混合,再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中,血清不影响其转染效果,不必刻意添加或更换培养液,操作十分简便。 产品特点 1、卓越的细胞转染性能:可高效转染多种原代细胞,转染效率可高达85%以上; 2、 极低的细胞毒性:使用可降解生物材料,细胞毒性低,转染细胞死亡率不到10%,大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响,实验结果更为客观; 3、操作简便,可用于含血清培养基培养细胞的转染,转染前后不需要更换培养液。 使用方法: 方法步骤(以24孔板转染为例): A、细胞接种: 1、转染前24小时左右对细胞进行转接,培养过夜; 2、确保转染时细胞密度为90%左右; 3、最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基,以防转染后孵育 阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。 B、PM /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染): 1、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,再加入适量的转染 试剂,见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。 2、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基,加入适量的溶液 A,轻轻混匀,再加入适量的DNA,见附表。用移液器再次轻轻 混匀后在室温静置5分钟。 3、将DNA-培养基混合物滴加至PM -培养基混合物中,用移液器 轻轻混匀后在室温静置15~20分钟后,立即转染。注意: PM - 培养基混合物和DNA-培养基混合物的混合次序非常重要,切勿颠倒。 注意:离心管最好使用聚丙烯离心管。 C、转染: 1、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中,边加边轻轻晃动培养 板以使复合物均匀分布。加完后,立即将培养板转入培养箱继续培养。 2、培养12小时后即可观察,最佳观察或收获时间为24~48小时。 3、PM 在完全培养基中仍有较高的转染效率,因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基,请于加入PM /DNA复合物12~24小时后进行。 附表:不同培养体系推荐初始转染条件
培养皿 |
96 孔板 |
48 孔板 |
24 孔板 |
12 孔板 |
6 孔板 |
10cm 皿 |
表面积cm2 |
0.35 |
1 |
1.9 |
3.8 |
9.6 |
59 |
培养基、试剂、DNA 量 |
无血清培养基(μl) |
20 |
50 |
100 |
200 |
400 |
2000 |
溶液 A (μl) |
0.4 |
1 |
2 |
4 |
8 |
40 |
PM(μl) |
0.5 |
1.3 |
2.5 |
5 |
10 |
50 |
1μg/μl plasmid (μl) |
0.16 |
0.4 |
0.8 |
1.6 |
3.2 |
16 |
完全培养基(ml) |
0.1 |
0.25 |
0.5 |
1 |
2 |
10 |
储存/保存方法: 4-8℃保存,有效期1年 技术指标: 试剂盒包装:
货 号 |
PM |
溶液 A |
abs60256-0.5ml |
0.5ml |
0.40ml |
abs60256-1.0ml |
1.0ml |
0.80ml |
abs60256-1.5ml |
1.5ml |
1.2ml |
产品用途: 大鼠肝细胞、血管平滑肌细胞、血管内皮细胞、肺泡上皮细胞、乳腺癌细胞、肺癌细胞、大肠癌细胞、肝癌细胞等 注意事项: 注意: 本产品仅用于科研实验 产品信息订购:
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