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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20 ℃保存,有效期24个月。
- 英文名:
dsDNase
- 库存:
99
- 供应商:
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 规格:
50rxns
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产品描述: 产品名称:双链DNA酶 描述: dsDNase 是一种核酸内切酶,能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键,生成带有 5'- 磷酸和 3'- 羟基末端的寡核苷酸。dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA(double-stranded DNA, dsDNA)而不会消化单链
活性定义 根据 Kunitz 实验方法,在 25℃ pH 5.0 的条件下,以过量的大分子 DNA 为底物,在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的酶量定义为 1 个活性单位(U)。 储存缓冲液 25 mM Tris-HCl (pH7.5,@25℃ ), 2.0 mM MgCl2, 10 mM NaCl,0.01 % (v/v) Triton X-100, 50 % (v/v) glycerol。 抑制与失活 抑制条件:金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性; 失活条件:55℃温育 5 min。 质量控制 蛋白质纯度 通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色,该酶纯度 ≥90%。 RNA 酶活性检测 将酶液与 RNA 底物 在 37 温育 1 h,通过凝胶电泳检测没有发现RNA 底物降解。 功能检测 该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了RT-qPCR 扩增,发现去除率 ≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。 使用方法: 使用方法
3、65℃热失活 2 min,迅速将获得的 RNA 置于冰上,用于后续实验。长期保存请置于 -80℃,避免反复冻融。 注意事项: 1、若 RNA 样本下游用于 RT-PCR,且目的基因长度 ≥3 kb,失活步骤前需添加终浓度为 10 mM 的 DTT; 储存/保存方法: -20 ℃保存,有效期24个月。
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文献和实验酶组织化学酶显示方法 1.偶联偶氮色素法 此法又称偶氮色素法(couplingazo dyemethod),是指用某种人工合成底物在酶作用下产生分解产物,分解产物与重氮盐结合,引起偶联偶氮反应,形成不溶性偶氮色素,以此对酶定位。常用的底物是萘酚系列化合物,如l―萘酚、2―萘酚、6―溴―2―萘酚、萘酚AS、萘酚AS衍生物等。由于重氮盐的种类不同,偶氮色素的颜色也不同,可显示出紫色、蓝色、红色、褐色、棕色和黑色等各种颜色。 重氮盐有不同程度的抑制酶活性作用,因此必须选择抑制作用最弱
存在于胎盘、马睾丸等微粒体部分,使△4 -3- 氧甾醇的 A 环芳构化,变成酚型酶。开始是 19 位的甲基由 19- 羟化酶进行二次羟化成为二羟化物,接着脱水形成 19- 氧代化物,然后,在 10 位与 19 位之间切断的同时失去 1 位与 2 位的氢而成为醌,烯醇化后生成酚。因此,此系统由 19- 羟化酶与 C 10 -C 19 裂解酶构成,均需要分子态氧与 NADPH 。
异质双链 DNA heteroduplex DNA 在构成双链 DNA的二条链之间碱基排列不是完全互补的,局部存在有不能形成碱基对的区段,这种 DNA称为异质双链 DNA。例如局部有不相同区段的二种 DNA, aa′和 bb′放在一起( a, a′和 bb′表示为各互补的单链),一当各一条单链全变性后,又使之恢复双链,这时除了与原来双链完全一样的 aa′和 bb′的双链外,还形成相对两链起过互换的异质双链 DNAab′和 a′ b。在这种 DNA分子中,只有互补碱基的部分
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