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双链DNA酶

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  • abs60248
  • 上海
  • 2025年07月16日
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      -20 ℃保存,有效期24个月。

    • 英文名

      dsDNase

    • 库存

      99

    • 供应商

      爱必信(上海)生物科技有限公司

    • 规格

      50rxns

    公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究不用于临床应用及其他用途提供产品和服务也不为任何个人提供产品和服务)!

     

    产品描述:

    产品名称:双链DNA酶

    描述:         dsDNase 是一种核酸内切酶,能够裂解 DNA 中的磷酸二酯键,生成带有 5'- 磷酸和 3'- 羟基末端的寡核苷酸。dsDNase 能够特异性的消化双链 DNA(double-stranded DNA, dsDNA)而不会消化单链
    DNA、引物、探针和 RNA。dsDNase 具有热敏感性,可在 55℃条件下快速失活。dsDNase 主要用于反转录实验前快速去除 RNA 样本中的基因组 DNA 污染,与传统的使用 DNase I 去除基因组 DNA 污染
    的方法相比,无需额外加入 EDTA 失活,可减少对 RNA 的损伤,同时节省实验时间,保证 RNA 水平定量的准确性。
    产品组成 

    组分 规格
    dsDNase(1 rxn/μl) 50 μl
    10× dsDNase Buffer 200 μl

    活性定义
    根据 Kunitz 实验方法,在 25℃ pH 5.0 的条件下,以过量的大分子 DNA 为底物,在 260 nm 波长处每分钟能引起吸光度增加 0.001 的酶量定义为 1 个活性单位(U)。
    储存缓冲液
    25 mM Tris-HCl (pH7.5,@25℃ ), 2.0 mM MgCl2, 10 mM NaCl,0.01 % (v/v) Triton X-100, 50 % (v/v) glycerol。
    抑制与失活
    抑制条件:金属离子、EDTA、SDS、DTT、β- 巯基乙醇、高盐离子浓度等会抑制 dsDNase 的活性;
    失活条件:55℃温育 5 min。
    质量控制
    蛋白质纯度
    通过 SDS-PAGE 并考马斯亮蓝染色,该酶纯度 ≥90%。
    RNA 酶活性检测
    将酶液与 RNA 底物 在 37 温育 1 h,通过凝胶电泳检测没有发现RNA 底物降解。
    功能检测
    该产品被用于测试去除来自 RNA 样本中的基因组 DNA 并进行了RT-qPCR 扩增,发现去除率 ≥99.9%。RNA 数量不受 dsDNase 处理的影响。

    使用方法: 使用方法
    1、于冰上配制如下反应体系: 

    试剂 使用量
    dsDNase 1 μl
    10× dsDNase Buffer 1 μl
    模板 RNA X μl
    总 RNA 1 pg~5 μg/10 μl
    mRNA 0.1 pg~500 ng/10 μl
    特异性 RNA 0.01 ng~500 ng/10 μl
    Nuclease-Free Water To 10 μl 
    2、轻轻吹打混匀反应体系后,将以上混合液在 37℃温育 2~5 min;
    3、65℃热失活 2 min,迅速将获得的 RNA 置于冰上,用于后续实验。长期保存请置于 -80℃,避免反复冻融。

    注意事项: 1、若 RNA 样本下游用于 RT-PCR,且目的基因长度 ≥3 kb,失活步骤前需添加终浓度为 10 mM 的 DTT;
    2、为避免 RNA 降解,可在反应体系中加入适量的 RNase Inhibitor。

    储存/保存方法: -20 ℃保存,有效期24个月。

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