公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)! 产品描述: 产品名称:全能核酸酶 英文别名: MultiNuclease 描述: MultiNuclease全能核酸酶,又称广谱核酸酶,是一种来源于Serratia Marcescens的非限制性核酸内切酶。它能够在非常广泛的条件下(6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解所有形式的(双链、单链、线状、环状或超螺旋形式)DNA和RNA,生成含有5’-磷酸末端的3-5个寡核苷酸残基片段,广泛用于去除生物制品中的核酸。 本品经基因工程改造在 Escherichia coli (E. coli)中表达纯化,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。 该酶与 BacReady-Protein Extraction Solution 和 RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提试剂配合使用,从而消除粗提物中的核酸,降低粘度。 来源: E. Coli(BL21) 外观: 无色透明液体 分子量: 26KD 应用: 蛋白提取时去除核酸污染;2D 凝胶电泳; Western Blot ;IP- Western 纯度: ≥95% 活性: 酶活:≥250U/ul 在过量底物条件下,37℃反应时间30分钟,使260 nm处的吸光度变化为1.0定义为一个酶活。 浓度: 推荐使用条件:
条件参数 |
最佳条件 |
有效条件 |
Mg2+ |
1-2mM |
1-10mM |
pH |
8.0 |
6-10 |
温度 |
37℃ |
0-42℃ |
DTT |
0-100mM |
>0mM |
巯基乙醇 |
0-100mM |
>0mM |
单价阳离子 |
0-20mM |
0-150mM |
磷酸根离子 |
0-10mM |
0-100mM |
推荐使用量及处理时间:
用量(终浓度) |
处理时间 |
0.25 U/mL |
>1 h |
2.5 U/mL |
>15 min |
25 U/mL |
>2 min |
使用方法: 1、样本准备: 贴壁细胞:去除培养基,用 PBS 清洗细胞,去除上清。 悬浮细胞:离心收集细胞,用 PBS 清洗细胞,6,000 rpm 离心 10 min,收集沉淀。 大肠杆菌:离心收集菌体,用 PBS 清洗 1 次,8,000 rpm 离心 5 min,收集沉淀。 2、样品处理: 将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比 1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g 细胞约为 109 个)。 3、酶的添加: 按照 250 Units 消化 1 g 细胞沉淀的比例添加,也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。 4、上清获取: 以 12,000 rpm 的转速离心 30min 获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。 【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。 储存/保存方法: stored at -20℃,有效期1年。 本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油)中,为无色透明液体。 技术指标: 内毒素含量:< 0.25EU/1500U 比活:≥1.1*106U/mg 产品信息订购:
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