广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒

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产品描述：

产品名称：广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒

描述:
该试剂盒采用磁珠法和新型独特的溶液系统，适合于从植物样品中快速简单地提取基因组DNA。可快速完成一个或多个100mg新鲜或20mg干燥的植物样品DNA的纯化工作。磁珠在高盐、低pH值状态下选择性地结合DNA，再通过漂洗液将杂质和其它成分去除，最后用低盐、高pH值的洗脱缓冲液将DNA从磁珠上洗脱，纯化后的DNA可直接用于PCR、酶切和杂交等实验。

产品特点：
1、简单快速、无毒无害。
2、多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。
自备试剂：无水乙醇

产品信息：

使用方法:

提示： 

1、第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及 时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

2、第一次使用前请先在缓冲液 AP3/E 中加入指定量无水乙醇!

操作：

1、取适量植物组织（新鲜组织 100mg 或干重组织 20mg）在研钵中加入液氮充分碾磨 成细粉。

2、转移细粉到一个 1.5ml 离心管，不要解冻，加入 400μl 缓冲液 AP1 和 4μl RNase A(10 mg/ml)，旋涡振荡，充分混匀帮助裂解。

3、65℃水浴 10min，在水浴过程中颠倒离心管 2-3 次，混合样品。

4、加入 130μl 缓冲液 AP2，充分混匀，冰上放置 5 min，12,000rpm 离心 5-10 min，小 心吸取上清到一个新的 1.5ml 离心管。

5、计算上清量，加入 1.5 倍体积的 AP3/E（请先检查是否已加入无水乙醇!），立即吹打 混匀。

6、将上一步所得混合物（包括可能出现的沉淀）加入一个吸附柱 AC 中，（吸附柱放入 收集管中）12,000rpm 离心 30-60 sec，倒掉废液，吸附柱 AC 放入收集管中。

7、加入 500μl 漂洗液 WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心 30 sec， 弃掉废液。

8、重复操作步骤 7。

9、将吸附柱 AC 放回空收集管中，12,000rpm 离心 2 min，将吸附柱置于室温放置数分 钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

10、取出吸附柱 AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加 50-100μl 洗脱 缓冲液 EB（洗脱缓冲液可事先在 65℃水浴中预热）， 室温放置 2-5 min，12,000rpm 离心 1 min。为了增加基因组 DNA 的得率，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，室 温放置 2 min，12,000rpm 离心 1 min。 注意：DNA 产物应保存在-20℃， 以防 DNA 降解。

储存/保存方法: 室温保存，有效期12个月。
 

注意事项:

1、裂解液 AP1、AP3/E 低温时可能出现析出和沉淀，可以在 37℃水浴几分钟帮助重新 溶解（AP3 加入乙醇前可加热，加入乙醇后不可加热），恢复澄清透明后冷却到室温 即可使用。

2、避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化。

3、缓冲液 AP3/E 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和 衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

4、洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗 脱， 但应该确保 pH 大于 7.5， pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱 DNA 应该保存在 -20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用 TE 缓冲液洗脱 （10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，pH 8.0），但是 EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

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